舒筋健脑方对缺血缺氧脑瘫模型大鼠细胞凋亡的影响

姜煜; 徐林; 赵亚林; 刘港; 张亚奇; 白惠中; 任敬佩; 曾杰; 穆晓红

doi:10.12307/2024.395

摘要：背景:围产期缺血缺氧性脑损伤是脑性瘫痪发生的最常见原因之一.舒筋健脑方是北京中医药大学东直门医院骨科治疗脑瘫、改善脑部供血的经验方剂. 目的:探讨舒筋健脑方改善脑性瘫痪缺血缺氧的作用机制. 方法:采用64只新生7 d龄SD大鼠,随机分为6组,对照组、模型组各12只,米诺环素组、舒筋健脑方低、中、高剂量组各10只.除对照组外,其余各组建立新生大鼠缺血缺氧脑瘫模型.造模成功后的药物组大鼠分别进行米诺环素、舒筋健脑方各剂量[4,8,16 g/(kg·d)]灌胃,每日1次,持续1周.给药前后测量各组大鼠的体质量,检测行为学变化,苏木精-伊红染色观察大鼠脑组织海马CA1区组织形态,免疫组化和Western Blot检测大鼠脑组织Bcl-2、Bax、Caspase-3的表达水平. 结果与结论:①体质量:与模型组比较,舒筋健脑方中、高剂量组大鼠体质量得到显著增加(P<0.05);②行为学:与模型组比较,米诺环素组大鼠有效延长了悬吊时间(P<0.05),舒筋健脑方中、高剂量组大鼠有效延长了悬吊时间、缩短了倾斜板实验时间、提升了Longa评分(P<0.05);③组织形态:药物组大鼠脑组织仅少量神经细胞坏死形成,细胞排列较整齐,细胞结构较为完整,只部分细胞核变小;④免疫组化和Western Blot结果:与模型组比较,米诺环素组、舒筋健脑方中、高剂量组Bax和Caspase-3的表达减少(P<0.05),舒筋健脑方中、高剂量组Bcl-2表达增加(P<0.05),米诺环素组、舒筋健脑方各剂量组Bcl-2/Bax蛋白表达增加(P<0.05),蛋白表达量随舒筋健脑方的剂量增加而增加,且舒筋健脑方高剂量组与米诺环素组作用差异无显著性意义(P>0.05);⑤结果说明,舒筋健脑方治疗缺血缺氧脑瘫大鼠的机制可能是提升抗凋亡蛋白Bcl-2表达,抑制促凋亡蛋白Bax的表达,降低Caspase-3的蛋白表达,最终抑制脑瘫大鼠海马组织细胞凋亡;舒筋健脑方在一定范围内,剂量越高治疗效果越好,且高剂量使用疗效不亚于米诺环素.