DOI: 10.12307/2024.734
温肾通络止痛方对小鼠H型骨微血管内皮细胞/骨髓间充质干细胞共培养体系的影响
周士杰1
李沐哲1
员浬1
张天驰1
牛园园1
朱弈桦1
周勤峰1
郭杨2
马勇3
王礼宁4
1.南京中医药大学,骨伤修复与重建新技术实验室,江苏省 南京市 2100232.南京中医药大学,骨伤修复与重建新技术实验室,江苏省 南京市 210023;南京中医药大学,中医学院·中西医结合学院,江苏省 南京市 2100233.南京中医药大学,骨伤修复与重建新技术实验室,江苏省 南京市 210023;南京中医药大学,中医学院·中西医结合学院,江苏省 南京市 210023;南京中医药大学无锡附属医院,江苏省中医退行性骨关节病临床医学创新中心,江苏省 无锡市 2140714.南京中医药大学,骨伤修复与重建新技术实验室,江苏省 南京市 210023;南京中医药大学无锡附属医院,江苏省中医退行性骨关节病临床医学创新中心,江苏省 无锡市 214071
摘要：背景:骨骼依赖血管与骨细胞之间的密切连接来维持完整性,骨骼处在生理低氧环境中,因此在低氧环境下研究血管生成与骨生成具有重要意义.
目的:探究在低氧环境下温肾通络止痛方对H型骨微血管内皮细胞/骨髓间充质干细胞共培养体系的影响及相关机制.
方法:运用酶消化法及流式分选技术,分选小鼠H型血管特异型骨微血管内皮细胞;应用骨髓贴壁法分离获取小鼠骨髓间充质干细胞;采用Transwell小室以及缺氧培养工作站建立两种细胞低氧共培养体系,使用50,100 μg/mL质量浓度温肾通络止痛方冻干粉进行干预;通过划痕迁移实验与管形成实验评估共培养体系内H型骨微血管内皮细胞的成血管功能;通过碱性磷酸酶染色与茜素红染色评估共培养体系内骨髓间充质干细胞的成骨分化能力;使用Western Blotting与q-PCR检测共培养体系内H型骨微血管内皮细胞中PDGF/PI3K/AKT信号轴相关分子的蛋白表达及mRNA表达.
结果与结论:①与常氧组相比,低氧组H型骨微血管内皮细胞划痕迁移率及新生血管长度均显著升高(P<0.05),骨髓间充质干细胞成骨分化能力增强(P<0.05);PDGF/PI3K/AKT信号轴相关分子的蛋白、mRNA表达升高(P<0.05);②与低氧组相比,经不同质量浓度温肾通络止痛方干预后H型骨微血管内皮细胞划痕迁移率及新生血管长度进一步提高(P<0.05),骨髓间充质干细胞成骨分化能力更强(P<0.05),PDGF/PI3K/AKT信号轴相关分子的蛋白、mRNA表达也进一步升高(P<0.05).结果表明:低氧条件下H型血管生成及骨生成可能与PDGF/PI3K/AKT信号轴有关,而温肾通络止痛方可能通过激活PDGF/PI3K/AKT信号轴促进"H型血管生成-骨生成"作用从而防治骨质疏松症.
关键词：温肾通络止痛方H型骨微血管内皮细胞骨髓间充质干细胞低氧血管生成骨生成
分类号：R459.9(治疗学)R394.2(医学遗传学)R542.2(心脏、血管（循环系）疾病)
论文发表日期：2025-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：8( 8-15 )
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