DOI: 10.12307/2024.730
补骨脂素对环磷酰胺抑制小鼠骨髓间充质干细胞成骨分化的恢复作用
王成龙1
杨志烈2
常君丽2
赵永见2
赵东峰2
戴薇薇1
吴宏进1
张婕1
王利波1
谢颖3
唐德志2
王拥军2
杨燕萍2
1.上海中医药大学附属龙华医院,科技中心实验室,上海市 2000322.上海中医药大学附属龙华医院,脊柱病研究所,海市 2000323.上海中医药大学附属龙华医院,中医外科研究所,上海市 200032
摘要：背景:补骨脂素具有很强的抗骨质疏松活性,可能对化疗导致的骨质疏松具有恢复作用.
目的:探讨补骨脂素对环磷酰胺抑制小鼠骨髓间充质干细胞成骨分化的恢复作用及机制.
方法:分离培养C57BL/6小鼠骨髓间充质干细胞,以MTT法检测补骨脂素对骨髓间充质干细胞活力的影响,以成骨诱导结合碱性磷酸酶染色确定补骨脂素对环磷酰胺抑制骨髓间充质干细胞成骨分化恢复作用的最佳剂量.采用RT-qPCR法检测补骨脂素干预不同时间点成骨分化标志基因Runx2、ALP、Osteocalcin、骨保护素及Wnt/β-catenin 信号通路相关基因Wnt1、Wnt4、Wnt10b、β-catenin、c-MYC的mRNA表达;采用Western blot 法检测补骨脂素干预不同时间点成骨特异性转录因子Runx2及Wnt/β-catenin 信号通路相关基因Active β-catenin、DKK1、c-MYC、Cyclin D1的蛋白表达.
结果与结论:①不同浓度补骨脂素对骨髓间充质干细胞活力没有显著影响;200 μmol/L补骨脂素干预后对环磷酰胺诱导骨髓间充质干细胞成骨分化抑制的恢复作用最佳;②补骨脂素可以逆转环磷酰胺条件培养基导致的骨髓间充质干细胞成骨标志基因Runx2、ALP、Osteocalcin、骨保护素mRNA表达和Runx2蛋白表达的降低;③补骨脂素可以逆转环磷酰胺条件培养基导致的骨髓间充质干细胞Wnt/β-catenin通路相关基因Wnt4、β-catenin、c-MYC mRNA表达和Active β-catenin、c-MYC、Cyclin D1蛋白表达的降低以及DKK1蛋白表达的升高;④结果表明,环磷酰胺能抑制小鼠骨髓间充质干细胞成骨分化,补骨脂素对其具有恢复作用,且200 μmol/L补骨脂素干预效果最佳,而这种保护作用可能与补骨脂素激活Wnt4/β-catenin信号通路有关.
关键词：环磷酰胺骨髓间充质干细胞成骨分化补骨脂素Wnt4β-catenin
分类号：R459.9(治疗学)R394.2(医学遗传学)R318(医用一般科学)
论文发表日期：2025-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：8( 16-23 )
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