DOI: 10.12307/2025.031
熊果酸干预人牙周膜干细胞成骨分化的效应
郑茜1
刘萍萍2
顾煜婕1
谢蕾3
1.西南医科大学附属口腔医院,正畸科,四川省 泸州市 646000;口颌面修复重建和再生泸州市重点实验室,四川省泸州市6460002.南充市中心医院口腔科,四川省南充市 6370003.西南医科大学附属口腔医院,正畸科,四川省 泸州市 646000;口颌面修复重建和再生泸州市重点实验室,四川省泸州市646000;西南医科大学附属口腔医院,城北门诊部,四川省泸州市 646000
摘要：背景:熊果酸可促进骨髓间充质干细胞向成骨细胞定向分化,但其对人牙周膜干细胞是否具有促成骨作用目前相关报道少见.
目的:探讨熊果酸对人牙周膜干细胞增殖和成骨分化能力的影响.
方法:分离、培养人牙周膜干细胞,取第3代细胞,分别采用含不同浓度(0,1,2,4,6,8 μmol/L)熊果酸的普通培养基干预,干预1,3,5,7 d后,采用CCK-8法检测细胞增殖,筛选适宜干预浓度.取第3代人牙周膜干细胞,分别用含0,1,2,4 μmol/L熊果酸的成骨诱导液干预,干预7 d后,采用qRT-PCR法检测碱性磷酸酶、Runx2、骨钙素mRNA的表达,干预14 d后,茜素红染色观察矿化结节形成.取第3代人牙周膜干细胞,对照组加入成骨诱导液,熊果酸组、拮抗剂组分别加入含熊果酸(2 μmol/L)、骨形态发生蛋白信号通路拮抗剂Noggin的成骨诱导液,熊果酸+拮抗剂组加入含熊果酸(2 μmol/L)、骨形态发生蛋白信号通路抑制剂Noggin的成骨诱导液,培养7 d后,采用qRT-PCR和Western blot检测骨形态发生蛋白2、Smad1、骨桥蛋白、Runx2的mRNA及蛋白表达.
结果与结论:①1,2,4 μmol/L熊果酸可促进人牙周膜干细胞的增殖,6,8 μmol/L熊果酸可抑制人牙周膜干细胞的增殖,后续实验选择1,2,4 μmol/L熊果酸进行干预;②与0 μmol/L相比,1,2,4 μmol/L熊果酸可促进碱性磷酸酶、Runx2、骨钙素mRNA的表达以及矿化结节的形成(P<0.05),其中以2 μmol/L熊果酸效果最显著;③与对照组比较,熊果酸组骨形态发生蛋白2、Smad1、骨桥蛋白、Runx2的mRNA及蛋白表达均升高(P<0.05),拮抗剂组上述指标的mRNA及蛋白表达均降低(P<0.05);与熊果酸组比较,熊果酸+拮抗剂组上述指标的mRNA及蛋白表达均降低(P<0.05);④结果表明,熊果酸可通过激活骨形态发生蛋白信号通路促进人牙周膜干细胞的成骨分化.
关键词：人牙周膜干细胞熊果酸成骨骨形态发生蛋白信号通路碱性磷酸酶骨钙素骨形态发生蛋白2Smad1蛋白
分类号：R459.9(治疗学)R318(医用一般科学)R78(口腔科学)
论文发表日期：2025-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：7( 80-86 )
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