DOI: 10.12307/2025.239
KRT18与mRNA及长链非编码RNA互作调控椎间盘髓核细胞损伤的机制
刘钟元1
李扬2
张志文2
1.湖北中医药大学针灸骨伤学院,湖北省 武汉市 4300612.湖北中医药大学附属医院、湖北省中医院、湖北省中医药研究院,湖北省 武汉市 430061
摘要：背景:椎间盘中差异表达的RNA结合蛋白在椎间盘退变中发挥着关键作用,其中RNA结合蛋白KRT18水平的降低与椎间盘退行性病变相关,但其在椎间盘髓核细胞中的具体作用尚未完全确定.
目的:探讨KRT18与mRNA及长链非编码RNA结合互作对椎间盘髓核细胞的影响及机制.
方法:对因腰部骨折或椎间盘退行性病变而接受椎间融合术的患者进行人体髓核组织取样获得正常髓核细胞和退变髓核细胞,并进行iRIP-seq、功能富集分析以及DNA 微阵列分析,随后根据分析结果在髓核细胞中敲低KRT18,通过蛋白免疫印迹及qRt-PCR在蛋白和RNA水平检测相关基因水平的表达.
结果与结论:通过iRIP-seq分析发现GUAAUC和AGCCUC序列中存在大量的KRT18结合位点,表明KRT18可参与调控RNA的转录、翻译、稳定性或在细胞信号传导途径中发挥作用.其能够与成熟的mRNA稳定结合,其中表达较高的基因包括CRLF1及IGFBP4等,同时与其结合的长链非编码RNA的峰值基因包括SNHG25、SNHG12、NEAT1、USP32、EIF4A2和CDH4,这些基因多涉及细胞凋亡、炎症等多种生物过程,并且能介导细胞外基质代谢的相关通路,KRT18能够调控它们的稳定性、转运、翻译、剪接等多个方面的功能,进而影响基因的表达和细胞功能.实验结果验证了在髓核细胞中敲低KRT18,细胞外基质代谢水平被抑制出现失衡,导致体外椎间盘退变.该研究首次从KRT18与mRNA及长链非编码RNA结合的角度探讨其调控机制,并推测了KRT18在椎间盘退变发病机制中的潜在功能,为今后KRT18关键功能的研究奠定了基础.
关键词：椎间盘退行性变RNA结合蛋白KRT18iRIP-seqmRNA长链非编码RNA
分类号：R496(康复医学)R318(医用一般科学)R681(骨科学（运动系疾病、矫形外科学）)
论文发表日期：2025-01-11
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：10( 312-321 )
英文信息