DOI: 10.12307/2024.833
BYL-719对结核杆菌诱导异常破骨细胞分化的作用及机制
张俊1
郭建1
贾麒钰1
汤丽丽1
王茜1
阿卜杜萨拉木·阿力木江1
吴桐1
买合木提·亚库甫2
马创1
1.新疆医科大学第一附属医院创伤骨科,新疆维吾尔自治区乌鲁木齐市 8300542.新疆医科大学第六附属医院,新疆维吾尔自治区乌鲁木齐市 830054
摘要：背景:PI3K/AKT信号通路调控破骨激活在维持骨稳态中具有关键作用,而骨关节结核中的骨质破坏正是由于结核杆菌感染引起的异常破骨细胞生成所致,但是PI3K信号通路在结核杆菌诱导的异常破骨细胞生成中发挥的作用尚不明确.
目的:探究PI3K/AKT信号通路抑制剂BYL-719对结核杆菌诱导的异常破骨细胞生成的影响及机制.
方法:使用牛结核杆菌卡介苗(BCG)感染RAW264.7细胞,Ag85B进行细胞免疫荧光染色;CCK-8法确定BYL-719安全使用浓度.实验分为空白对照组、BYL-719组、卡介苗组、卡介苗+BYL-719组.各组细胞在RANKL诱导下,通过抗酒石酸酸性磷酸酶染色和鬼笔环肽染色,探究BYL-719对结核杆菌感染后破骨细胞分化、融合的影响;RT-PCR和Western Blot检测破骨细胞相关基因及蛋白表达情况,并进一步探索作用机制.
结果与结论:①免疫荧光染色结果显示,RAW264.7细胞吞噬结核杆菌;②CCK-8数据显示,40 nmol/L浓度BYL-719没有细胞毒性;③抗酒石酸酸性磷酸酶染色和鬼笔环肽染色提示,BYL-719能抑制结核杆菌感染后的破骨细胞生成、融合能力;④RT-PCR和Western blot结果也提示,BYL-719抑制了结核杆菌感染诱导的破骨细胞特异性基因(包括c-Fos、NFATc1、基质金属蛋白酶9和CtsK)表达升高(P<0.05);⑤Western blot和免疫荧光染色结果揭示,BYL-719通过下调IκBα-p65来抑制结核杆菌诱导的破骨细胞过度分化;⑥结论:BYL-719通过下调IκBα/p65抑制结核杆菌诱导的异常破骨细胞生成,说明IκBα/p65信号通路是骨关节结核潜在治疗靶点,BYL-719有预防和改善骨关节结核中骨质破坏的潜在价值.
关键词：BYL-719结核杆菌感染破骨细胞骨结核PI3K/AKTRAW264.7卡介苗NF-κB
分类号：R496(康复医学)R318(医用一般科学)R681(骨科学（运动系疾病、矫形外科学）)
论文发表日期：2025-01-11
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：8( 355-362 )
英文信息