DOI: 10.12307/2025.014
淫羊藿苷预处理增强人牙周膜干细胞对M1型巨噬细胞的影响
喻婷1
吕冬梅1
邓浩2
孙涛2
程钎1
1.西南医科大学,口颌面修复重建和再生泸州市重点实验室,四川省 泸州市 646000;西南医科大学,口腔医学研究所,西南医科大学,四川省 泸州市 646000;西南医科大学附属口腔医院正畸科,四川省 泸州市 6460002.西南医科大学,口颌面修复重建和再生泸州市重点实验室,四川省 泸州市 646000;西南医科大学,口腔医学研究所,西南医科大学,四川省 泸州市 646000;西南医科大学,口腔医学院,四川省 泸州市 646000
摘要：背景:人牙周膜干细胞对M1型巨噬细胞促炎功能有一定抑制作用,具有抗炎等药理活性的淫羊藿苷是否能增强人牙周膜干细胞对M1型巨噬细胞的抑制作用尚不明确.
目的:探究淫羊藿苷预处理人牙周膜干细胞后对M1型巨噬细胞的影响.
方法:分离培养原代人牙周膜干细胞,并进行鉴定.对THP-1细胞进行诱导,采用免疫荧光染色及PCR进行M1型巨噬细胞鉴定.用含浓度10-7,10-6,10-5,10-4 mol/L淫羊藿苷的α-MEM完全培养基培养人牙周膜干细胞1,3,5,7 d,采用CCK-8法筛选合适的淫羊藿苷浓度进行实验.将α-MEM完全培养基、未处理的人牙周膜干细胞α-MEM条件培养基及淫羊藿苷预处理24 h的人牙周膜干细胞α-MEM条件培养基与RPMI-1640完全培养基以1∶1的比例对M1型巨噬细胞进行条件培养,分别为对照组、未处理组及预处理组,24 h后RT-PCR法检测M1型巨噬细胞炎症因子的mRNA表达情况;ELISA法检测M1型巨噬细胞炎症因子的蛋白表达情况;Western blot检测M1/M2型巨噬细胞表面标记物及核转录因子κB通路相关蛋白的表达.
结果与结论:①CCK-8检测结果显示,10-7,10-6,10-5,10-4 mol/L淫羊藿苷对人牙周膜干细胞均无细胞毒性,且从第5天起,各浓度都提高了细胞活力,促进细胞增殖,选择10-4 mol/L淫羊藿苷进行后续实验.②RT-PCR法及ELISA检测结果显示,与对照组相比,未处理组及预处理组均降低了M1型巨噬细胞白细胞介素1β、白细胞介素6及肿瘤坏死因子α的表达与分泌(P<0.05),且预处理组低于未处理组(P<0.05).③Western blot检测结果显示,与未处理组相比,预处理组CD86的表达明显降低(P<0.05);与对照组相比,未处理组和预处理组M2型巨噬细胞表面标志物CD206的表达均升高(P<0.01),且预处理组明显高于未处理组(P<0.01);M1型巨噬细胞经24 h条件培养后,与对照组相比,核转录因子κB/P65的表达在未处理组和预处理组均有降低(P<0.01),p-IκBα的表达仅在预处理组降低(P<0.01);与未处理组相比,预处理组核转录因子κB/P65和p-IκBα的表达均显著降低(P<0.05),而IκBα在3组中的表达差异无显著性意义.④上述结果证实,淫羊藿苷增强了人牙周膜干细胞对M1型巨噬细胞的抑制作用,此作用可能与抑制了巨噬细胞的核转录因子κB信号通路相关.
关键词：人牙周膜干细胞淫羊藿苷巨噬细胞条件培养基共培养表面标志物炎症因子抗炎核转录因子κB信号通路
分类号：R459.9(治疗学)R363(病理学)R364(病理学)
论文发表日期：2025-03-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：8( 1328-1335 )
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