DOI: 10.12307/2025.056
氧化苦参碱对牙周膜干细胞干性标志物表达和成骨分化的作用
罗晶1
雍敏2
陈琦2
杨长怡3
赵恬2
马静2
梅冬兰2
虎金鹏4
杨昭君4
王钰然4
刘博4
1.宁夏医科大学口腔医学院,宁夏回族自治区 银川市 750004;宁夏回族自治区干细胞与再生医学重点实验室,宁夏回族自治区 银川市 7500042.宁夏医科大学总医院,口腔正畸科,宁夏回族自治区银川市 7500043.宁夏医科大学总医院,牙周病科,宁夏回族自治区银川市 7500044.宁夏医科大学口腔医学院,宁夏回族自治区 银川市 750004
摘要：背景:人牙周膜干细胞是牙周再生组织工程潜在的功能细胞,然而长期体外培养会导致牙周膜干细胞干性减低并发生复制性衰老,从而影响其治疗效果.
目的:探讨氧化苦参碱在体外对牙周膜干细胞干性维持和骨向分化的影响,并寻找潜在的影响机制.
方法:采用组织块酶消化法从人牙周膜组织中分离、培养得到牙周膜干细胞,并使用流式细胞仪进行间充质细胞表面标志物鉴定.用0,2.5,5,10 μg/mL氧化苦参碱孵育牙周膜干细胞,通过CCK8实验检测氧化苦参碱对牙周膜干细胞增殖活性的影响,筛选后续实验合适的药物质量浓度,采用Western blot检测牙周膜干细胞中干细胞非特异性蛋白SOX2和OCT4的表达,采用qRT-PCR、Western blot检测牙周膜干细胞中成骨相关基因和蛋白表达水平.
结果与结论:①CCK8实验结果显示2.5 μg/mL氧化苦参碱对牙周膜干细胞增殖活性有显著增强作用,后续实验选用2.5 μg/mL氧化苦参碱进行干预;②与空白对照组相比,氧化苦参碱组牙周膜干细胞的干性标志物SOX2蛋白表达水平变化不明显(P>0.05),OCT4蛋白表达明显上调(P<0.05);③与成骨诱导组相比,氧化苦参碱+成骨诱导组牙周膜干细胞成骨相关基因ALP、RUNX2 mRNA表达及成骨相关蛋白ALP蛋白表达明显下调(P<0.05);④氧化苦参碱上调牙周膜干细胞干性标志物表达,抑制牙周膜干细胞骨向分化,高通量测序结果表明可能与WNT2、WNT16、COMP、BMP6有关.
关键词：牙周膜干细胞苦参碱类生物碱成骨细胞增殖氧化苦参碱干性维持高通量测序
分类号：R459.9(治疗学)R318(医用一般科学)R781.42(口腔内科学)
论文发表日期：2025-07-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：8( 3992-3999 )
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