DOI: 10.12307/2025.073
人尿源性干细胞的分离培养及诱导分化为平滑肌细胞
陈佳汇1
戴晓琪1
徐彦钢2
李远超3
黄妹1
詹一飞1
杜宇轩1
李鎏强1
郭耀川1
卞军1
赖德辉1
1.广州医科大学附属第五医院泌尿外科,广东省广州市 5100002.广州市中西医结合医院泌尿外科,广东省广州市 5100003.广州中医药大学临床针灸康复学院,广东省广州市 510000
摘要：背景:传统尿路修复重建手段受限于供体短缺、并发症多以及生理功能恢复不理想等问题,组织工程策略为此领域提供了新方向.鉴于尿路主要由肌性组织构成,其中关键在于发掘适合的种子细胞并高效诱导分化为平滑肌细胞,但关于不同平滑肌细胞诱导方案效能的对比研究仍较为匮乏.
目的:旨在分离、培养及鉴定人尿源性干细胞,并比较两种不同成平滑肌诱导方案的效果.
方法:采用多次离心法从11份健康成人志愿者尿液中分离提取尿源性干细胞,使用流式细胞仪进行表面标志物的鉴定,通过成骨、成脂诱导分化来验证尿源性干细胞的多向分化潜能.尿源性干细胞分别在含转化生长因子β1以及转化生长因子β1联合血小板衍生生长因子的成平滑肌细胞诱导分化培养基中诱导分化14 d,采用免疫荧光染色和Western blot检测平滑肌特异性蛋白(α-SMA、SM22)的表达差异.
结果与结论:①成功从8份健康人尿液中分离出尿源性干细胞,细胞呈"米粒"样,具有很好的分裂增殖能力;②尿源性干细胞高表达间充质干细胞表面标志物CD73、CD90和CD44,极低表达造血干细胞表面标志物CD34和CD45,不表达CD19、CD105和HLA-DR;③经成骨和成脂诱导分化后,可见明显的钙结节和脂滴形成,茜素红染色和油红O染色结果呈阳性;④成平滑肌诱导培养14 d,免疫荧光染色显示转化生长因子β1/血小板衍生生长因子组尿源性干细胞成平滑肌诱导分化率显著高于转化生长因子β1组(P<0.005);⑤成平滑肌诱导培养14 d,Western blot检测显示转化生长因子β1/血小板衍生生长因子组α-SMA和SM22蛋白表达量显著高于转化生长因子β1组(P<0.005).结果表明:尿源性干细胞可以通过多次离心法无创分离获取;相较于单纯转化生长因子β1,转化生长因子β1/血小板衍生生长因子联合应用能显著提高尿源性干细胞诱导分化为平滑肌细胞的效率.
关键词：尿源性干细胞诱导分化平滑肌细胞转化生长因子β1血小板衍生生长因子组织工程
分类号：R459.9(治疗学)R318(医用一般科学)R69(泌尿科学（泌尿生殖系疾病）)
论文发表日期：2025-07-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：7( 4076-4082 )
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