DOI: 10.12307/2025.769
高糖对hCMEC/D3人脑微血管内皮细胞血脑屏障紧密连接的影响
杨洪涛1
许永劼2
周勇君1
王双3
黄昶煜东2
朱丽英4
潘卫1
1.贵州医科大学附属医院贵州省产前诊断中心,贵州省贵阳市 550004;贵州医科大学医学检验学院,贵州省贵阳市 5500042.贵州医科大学附属医院贵州省产前诊断中心,贵州省贵阳市 5500043.贵州医科大学医学检验学院,贵州省贵阳市 5500044.贵州医科大学医学检验学院,贵州省贵阳市 550004;贵州医科大学附属医院临床检验中心,贵州省贵阳市 550004
摘要：背景:血脑屏障是保护中枢神经系统的重要结构,研究高糖对血脑屏障的影响对预防高糖导致的中枢神经系统损伤有重要意义.
目的:探讨高糖对hCMEC/D3人脑微血管内皮细胞血脑屏障功能的潜在影响.
方法:hCMEC/D3细胞分别以常规糖培养基(葡萄糖浓度25 mmol/L)和高糖培养基(葡萄糖浓度55 mmol/L)培养,光学显微镜观察细胞形态,CCK-8法检测细胞活力变化.采用Transwell小室将hCMEC/D3细胞系建立单层细胞血脑屏障模型,每日监测细胞跨膜电阻值变化,通过苯酚红透过率检测单层细胞的通透性,流式细胞术检测细胞凋亡率,Western blot检测细胞中Bcl-2、Bax、Caspase-3、ZO-1、Occludin、Claudin-1、组蛋白去乙酰化酶蛋白4的表达,ELISA检测细胞上清液中组蛋白去乙酰化酶水平,免疫荧光检测细胞中组蛋白去乙酰化酶4的表达.
结果与结论:①高糖组细胞活力显著低于对照组(P＜0.000 1);②对照组细胞生长状态良好,交织成致密网状,突触间相互连接;高糖组细胞生长受抑,细胞间突触连接减少;③与对照组相比,高糖组跨膜电阻值降低(P＜0.05),单层细胞膜苯酚红通透性增加(P＜0.05),细胞凋亡率升高(P＜0.01),Bax蛋白表达增加(P＜0.000 1),Caspase-3蛋白表达无明显变化(P＞0.05),Bcl-2、ZO-1、Occludin、Claudin-1、组蛋白去乙酰化酶4蛋白表达降低(P＜0.01,P＜0.001,P＜0.01,P＜0.000 1,P＜0.01),组蛋白去乙酰化酶4荧光表达降低(P＜0.001);④高糖组细胞上清液中组蛋白去乙酰化酶4水平低于对照组(P＜0.05).结果表明,高糖诱导hCEMCE/D3细胞凋亡增加,通透性增强,其机制可能与组蛋白去乙酰化酶4表达水平降低有关.
关键词：高糖血脑屏障紧密连接通透性细胞凋亡组蛋白去乙酰化酶4工程化组织构建
分类号：R459.9(治疗学)R318(医用一般科学)R587.2(内分泌腺疾病及代谢病)
论文发表日期：2025-09-11
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：7( 5536-5542 )
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