DOI: 10.12307/2025.915
香草酸抑制终板软骨细胞炎症反应和细胞外基质降解
于庆贺1
蔡子鸣2
吴锦涛2
马鹏飞1
张鑫1
周龙千2
王亚坤2
林晓钦2
林文平1
1.广州中医药大学附属深圳平乐骨伤科医院脊柱外科,广东省 深圳市 5181182.广州中医药大学附属深圳平乐骨伤科医院,广东省 深圳市 518118
摘要：背景:研究表明,香草酸具有抗炎、抗氧化应激的作用,但它对终板软骨细胞是否有保护作用尚不清楚.
目的:探讨香草酸对炎症微环境下终板软骨细胞的作用及机制.
方法:①从SD大鼠尾椎椎间盘中提取原代终板软骨细胞,通过甲苯胺蓝染色、Ⅱ型胶原蛋白免疫荧光鉴定;②CCK-8法检测白细胞介素1β、香草酸对终板软骨细胞增殖活力的影响,以确定后续处理细胞应用的香草酸浓度;③向完全培养基中添加10 ng/mL白细胞介素1β模拟炎症微环境,用低、中、高质量浓度的香草酸处理终板软骨细胞,通过Western blot、免疫荧光检测炎症标志物和细胞外基质蛋白表达;④Western blot检测核因子κB信号通路蛋白水平.
结果与结论:①贴壁培养的终板软骨细胞形态呈梭形或三角形,甲苯胺蓝染色、Ⅱ型胶原蛋白免疫荧光阳性,证明实验提取的细胞为终板软骨细胞;②CCK-8结果显示,2.5,5,10,20 μg/mL香草酸处理终板软骨细胞24 h无明显增殖抑制效果;与白细胞介素1β组相比,5,10,20 μg/mL香草酸处理24 h的终板软骨细胞活力显著提高(P＜0.05),因此后续选用5,10,20 μg/mL香草酸为低、中、高剂量组处理终板软骨细胞;③与模型组(含10 ng/mL白细胞介素1β的完全培养基)相比,香草酸低、中、高剂量组终板软骨细胞中NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3(NLRP3)、基质金属蛋白酶13、基质金属蛋白酶3、肿瘤坏死因子α蛋白表达水平均明显降低(P＜0.05);④与模型组相比,香草酸低、中、高剂量组终板软骨细胞中聚集蛋白聚糖、Ⅱ型胶原蛋白的蛋白表达水平显著增加(P＜0.05);⑤与模型组相比,香草酸低、中、高剂量组终板软骨细胞中磷酸化核因子κB和磷酸化核因子κB抑制蛋白的蛋白表达水平显著降低(P＜0.05);⑥结果说明香草酸可能通过抑制核因子κB信号通路激活减轻白细胞介素1β诱导的大鼠终板软骨细胞的炎症反应和细胞外基质降解.
关键词：香草酸终板软骨细胞炎症椎间盘退变核因子κB工程化组织构建
分类号：R459.9(治疗学)R318(医用一般科学)R681.5(骨科学（运动系疾病、矫形外科学）)
论文发表日期：2025-10-28
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：7( 6391-6397 )
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