717解毒合剂重塑细胞外基质稳态促进蝮蛇伤大鼠局部损伤组织的修复

王万春; 易军; 严张仁; 杨悦; 董德刚; 李玉梅

doi:10.12307/2025.906

摘要：背景:尽管抗蛇毒血清为蛇伤治疗带来了一线希望,但这种药物对由毒蛇引起的局部组织损伤并不总是有效的.此外,抗蛇毒血清还存在超敏反应、"血清病"等免疫反应、部分地区难以获得等诸多局限性.因此,探寻蛇伤补充或替代疗法及治疗靶点已成为当前临床急需解决的问题. 目的:观察717解毒合剂对蝮蛇伤大鼠局部组织细胞外基质蛋白及基质金属蛋白酶/组织金属蛋白酶抑制因子表达的影响. 方法:将SD大鼠随机分为对照组、模型组、抗蝮蛇毒血清组及717解毒合剂低、中、高剂量组.除对照组外,其余各组于左后肢腓肠肌注射蛇毒1.25 mL/kg进行造模,717解毒合剂低、中、高剂量组在注射蛇毒前预防性灌胃1.98,3.96,7.92 g/kg 717解毒合剂,连续给药7 d,抗蛇毒血清组于注射蛇毒2 h后尾静脉注射0.6 mL抗蛇毒血清.注射蛇毒后24 h,苏木精-伊红染色观察腓肠肌病理学变化,ELISA及qPCR检测血清及腓肠肌中基质金属蛋白酶2、基质金属蛋白酶9、组织金属蛋白酶抑制因子1、组织金属蛋白酶抑制因子2蛋白及mRNA表达水平,免疫组化检测腓肠肌中Ⅰ型胶原、Ⅳ型胶原、纤连蛋白、层粘连蛋白、α-平滑肌肌动蛋白、转化生长因子β1、CD31及血管内皮生长因子的表达. 结果与结论:①与对照组相比,模型组局部出现明显的炎细胞浸润及出血,肌肉结构紊乱,肌细胞变性坏死;血清及腓肠肌中基质金属蛋白酶2、基质金属蛋白酶9、组织金属蛋白酶抑制因子1蛋白及mRNA表达均升高(P＜0.05或P＜0.01),组织金属蛋白酶抑制因子2 mRNA表达降低(P＜0.01);腓肠肌中Ⅰ型胶原、Ⅳ型胶原蛋白表达显著降低(P＜0.01),层粘连蛋白、血管内皮生长因子及CD31蛋白表达升高(P＜0.05或P＜0.01),而纤连蛋白、α-平滑肌肌动蛋白、转化生长因子β1蛋白表达无统计学差异(P＞0.05).②与模型组相比,717解毒合剂各剂量组及抗蝮蛇毒血清组肌细胞损伤减轻,炎细胞浸润及出血现象改善;血清及腓肠肌中基质金属蛋白酶2、基质金属蛋白酶9、组织金属蛋白酶抑制因子1蛋白及mRNA表达明显降低(P＜0.05或P＜0.01);717解毒合剂高剂量组组织金属蛋白酶抑制因子2蛋白表达升高(P＜0.05);Ⅰ型胶原、Ⅳ型胶原、层粘连蛋白、α-平滑肌肌动蛋白、转化生长因子β1表达升高(P＜0.05或P＜0.01),且存在剂量效应关系;血管内皮生长因子蛋白表达降低(P＜0.05或P＜0.01),纤连蛋白表达无显著差异(P＞0.05);717解毒合剂低剂量组CD31蛋白表达升高(P＜0.01).结果表明,717解毒合剂可通过调控基质金属蛋白酶2、基质金属蛋白酶9与组织金属蛋白酶抑制因子1、组织金属蛋白酶抑制因子2的表达,促进α-平滑肌肌动蛋白、转化生长因子β1的产生,使细胞外基质的合成大于降解,维持细胞外基质稳态,进而促进蝮蛇咬伤局部组织损伤修复.