DOI: 10.12307/2025.546
C57BL/6新生乳鼠肠神经胶质细胞的提取与培养
赵楠1
丁勇1
修航2
刘鹏飞2
梁国刚2
1.大连医科大学附属第一医院,中西医结合临床国家重点学科实验室,辽宁省大连市 1160002.大连医科大学附属第一医院,普外三科,辽宁省大连市 116000
摘要：背景:炎症性肠病的发病机制涉及炎症、免疫激活、内脏高敏感、肠道菌群失调等,其中炎症促使免疫细胞释放炎症递质,损伤肠神经系统.肠神经胶质细胞是肠神经系统的重要组成部分,是研究肠道神经炎症的良好细胞.原代肠神经胶质细胞对于探索肠神经系统疾病的细胞疗法具有至关重要的作用,而目前获得该细胞的方法大多较繁琐,因此找到一种便捷、快速提取该细胞的方法十分关键.
目的:建立优化分离培养及鉴定小鼠肠神经胶质细胞的方法.
方法:通过过量吸入异氟烷处死0-7 d龄C57BL/6乳鼠,将其浸泡于体积分数75％乙醇消毒后腹正中线开腹取出十二指肠(幽门下1 cm至屈氏韧带上1cm),用1 mL注射器充满DPBS反复冲洗肠内容物至肠道半透明,剥离肠系膜及血管.将十二指肠剪至1mm大小,放入含0.25％EDTA胰酶中消化20 min后加入等量DMEM/F12完全培养基终止消化,用100 μm细胞滤器过滤后离心,加入1 mL DMEM/F12完全培养基重悬后培养细胞,细胞贴壁生长密度至80％时消化传代.细胞培养至第3代时用标记肠神经胶质细胞的胶质纤维酸性蛋白进行免疫荧光鉴定.
结果与结论:分离培养的细胞胶体饱满,突起向外延展,可以传代,胶质纤维酸性蛋白染色阳性.该方法可成功分离培养肠神经胶质细胞,且操作简便,为肠神经系统的病理生理学研究提供稳定的模型.
关键词：肠神经胶质细胞乳鼠细胞培养炎症性肠病肠神经系统胶质纤维酸性蛋白工程化细胞
分类号：R459.9(治疗学)R318(医用一般科学)R574(消化系及腹部疾病)
论文发表日期：2025-11-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：5( 6656-6660 )
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