DOI: 10.12307/2025.970
健骨方对破骨细胞-成骨细胞的偶联效应及作用机制
卢秀丽1
许华珍1
陈玉兴2
姚楠2
胡子旋2
黄丹娥2
1.广州中医药大学第五临床医学院,广东省 广州市 5100952.广东省第二中医院(广东省中医药工程技术研究院),广东省 广州市 510095;广东省中医药研究开发重点实验室,广东省 广州市 510095
摘要：背景:前期研究发现,健骨方可以通过抑制骨吸收促进骨形成起到双效抗骨质疏松的治疗作用,但其作用机制尚未阐明.
目的:考察健骨方对骨吸收-骨形成的偶联效应和作用机制.
方法:制备健骨方含药血清,通过MTT法测定健骨方含药血清对小鼠骨髓源巨噬细胞的毒性;应用CCK-8法测定健骨方含药血清对MC3T3-E1细胞增殖能力的影响;采用抗酒石酸酸性磷酸酶染色法测定健骨方含药血清对破骨细胞分化的抑制作用;制备健骨方条件培养基,通过碱性磷酸酶染色测定条件培养基偶联促进MC3T3-E1细胞成骨分化的作用;RT-qPCR法测定健骨方含药血清对破骨细胞偶联基因鞘氨醇激酶2、含胶原三螺旋重复蛋白1、Slit同源物3 mRNA水平以及条件培养基对骨形成相关基因分泌型磷酸蛋白1、碱性磷酸酶、SP7转录因子、酸性富含半胱氨酸分泌型蛋白 mRNA水平的影响.
结果与结论:①MTT法和CCK-8法结果显示,健骨方含药血清在低于5%浓度下对细胞无显著毒性作用;②抗酒石酸酸性磷酸酶染色结果显示,健骨方含药血清在2.5%、1.25%和0.63%浓度时剂量依赖性抑制破骨细胞的分化;③碱性磷酸酶染色结果显示,健骨方破骨细胞条件培养基呈剂量依赖性地促进成骨细胞分化;④RT-qPCR检测结果显示,0.63%健骨方含药血清可以提高破骨细胞源性偶联因子Slit同源物3和鞘氨醇激酶2的mRNA水平,其条件培养基可以提高骨形成相关基因分泌型磷酸蛋白1、SP7转录因子和酸性富含半胱氨酸分泌型蛋白mRNA表达水平;⑤提示健骨方含药血清能够在抑制骨吸收的情况下促进骨形成,其机制可能与促进骨吸收-骨形成偶联因子Slit同源物3和鞘氨醇激酶2的mRNA表达有关.
关键词：健骨方骨吸收骨形成骨质疏松症偶联破骨细胞成骨细胞骨稳态工程化组织构建
分类号：R459.9(治疗学)R318(医用一般科学)R580(内分泌腺疾病及代谢病)
论文发表日期：2025-11-18
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：8( 6828-6835 )
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