灰兜巴抑制高糖培养HK-2细胞的铁死亡减轻细胞纤维化

姚顺华; 黄彩丁; 张梦玉; 张可馨; 尹长江; 杨坤宝

doi:10.12307/2026.124

摘要：背景:糖尿病肾病与铁死亡密切相关,既往研究发现灰兜巴具有显著的降糖作用,对糖尿病肾病引起的肾脏氧化应激损伤及纤维化具有保护作用,还可降低高糖诱导的HK-2细胞纤维化水平. 目的:探究灰兜巴调控谷胱甘肽过氧化物酶4(Glutathione Peroxidase 4,GPX4)抑制高糖培养人肾皮质近曲小管上皮细胞(HK-2)铁死亡减轻细胞纤维化作用. 方法:①为探究灰兜巴对高糖培养HK-2细胞铁死亡及纤维化的干预作用,将细胞分为6组:对照组、模型组、灰兜巴低、中、高剂量组、罗格列酮组;观察HK-2细胞形态,检测细胞存活率及氧化应激相关指标丙二醛含量、谷胱甘肽水平,检测铁死亡相关指标GPX4、铁蛋白重链1、核因子E2相关因2、转铁蛋白受体及纤维化相关指标转化生长因子β1、肾损伤分子1的蛋白和mRNA表达.②为观察siRNA干扰HK-2细胞GPX4表达效果,将细胞分为NC组(阴性对照)、si-GPX4组;检测GPX4蛋白和mRNA表达.③为观察siRNA干扰GPX4对灰兜巴抑制高糖培养HK-2细胞铁死亡减轻细胞纤维化作用效果的影响,将细胞分为4组:NC组(阴性对照)、高糖组(30 mmol/L葡萄糖处理)、高糖+灰兜巴组(30 mmol/L葡萄糖+400 µg/mL灰兜巴水提物处理)、高糖+灰兜巴+si-GPX4组(经GPX4-siRNA处理后,再30 mmol/L葡萄糖+400 µg/mL灰兜巴水提物处理);检测丙二醛含量、谷胱甘肽水平、GPX4、铁蛋白重链1、核因子E2相关因2、转铁蛋白受体、转化生长因子β1、肾损伤分子1的蛋白和mRNA表达. 结果与结论:①与对照组相比,模型组细胞存活率、谷胱甘肽水平、GPX4、铁蛋白重链1、核因子E2相关因2蛋白和mRNA表达显著降低,丙二醛含量、转铁蛋白受体、转化生长因子β1、肾损伤分子1蛋白和mRNA表达显著升高;与模型组相比,灰兜巴各剂量及罗格列酮组可不同程度改善上述指标变化.②与NC组相比,si-GPX4组GPX4蛋白和mRNA表达显著降低;与高糖+灰兜巴组相比,高糖+灰兜巴+si-GPX4组谷胱甘肽水平、GPX4、铁蛋白重链1、核因子E2相关因2蛋白和mRNA表达显著降低,丙二醛含量、转铁蛋白受体、转化生长因子β1、肾损伤分子1蛋白和mRNA表达显著升高.③结果说明,灰兜巴可通过上调GPX4抑制高糖培养HK-2细胞铁死亡减轻细胞纤维化.