趋化因子受体7-骨髓间充质干细胞复合猪小肠黏膜下层促进大鼠皮肤损伤修复

范美荣; 李光琪; 宋旭梅; 闫昕; 随瑞枝

doi:10.12307/2026.058

摘要：背景:临床上对于皮肤损伤修复常用的自体及异体皮肤移植效果都不甚理想.近年来组织工程的发展为皮肤修复带来了新的希望,然而在皮肤组织工程中血管的再生一直是一个难题.猪小肠黏膜下层和骨髓间充质干细胞是当前广泛用于组织工程研究的天然细胞外基质类支架材料和种子细胞,趋化因子受体7是一种可以促发新生血管生成的细胞因子. 目的:观察趋化因子受体7-骨髓间充质干细胞-猪小肠黏膜下层膜对大鼠背部皮肤损伤的修复效果及血管再生能力. 方法:①过表达趋化因子受体7腺病毒载体转染骨髓间充质干细胞,Western blot及RT-qPCR方法评价转染效果;②将过表达趋化因子受体7的骨髓间充质干细胞与猪小肠黏膜下层复合培养,通过扫描电镜观察及活死细胞染色验证细胞相容性;③12只SD大鼠构建皮肤缺损动物模型,分别将趋化因子受体7-骨髓间充质干细胞-猪小肠黏膜下层(实验组)和猪小肠黏膜下层(对照组)置于大鼠皮肤缺损处,造模后1,3,7,14 d观察创面愈合情况,造模后7,14 d采用Western blot检测创面愈合组织中血管内皮生长因子蛋白表达,免疫组化染色检测创面组织CD31及增殖细胞核抗原蛋白表达. 结果与结论:①通过腺病毒介导成功构建过表达趋化因子受体7的骨髓间充质干细胞,趋化因子受体7转染组细胞内趋化因子受体7的蛋白、mRNA表达均较对照组和空载组明显上调(P<0.001);②扫描电镜观察及活死细胞染色实验结果显示过表达趋化因子受体7的骨髓间充质干细胞在猪小肠黏膜下层膜表面生长良好,二者具有良好的相容性;③与对照组相比,实验组创面面积明显缩小(P<0.05),实验组创面愈合组织中血管内皮生长因子、CD31、增殖细胞核抗原的蛋白表达高于对照组(P<0.05),表明趋化因子受体7-骨髓间充质干细胞-猪小肠黏膜下层膜的促创面血管生成能力较强.