DOI: 10.12307/2026.672
温肾通络止痛方通过外泌体miR-342-3p调控骨髓间充质干细胞骨脂分化平衡
吾米提·塔西1
王礼宁2
李沐哲1
孙杰1
陈双柳1
朱弈桦1
周士杰1
马勇3
郭杨1
1.南京中医药大学,骨伤修复与重建新技术实验室,江苏省 南京市 2100232.南京中医药大学,骨伤修复与重建新技术实验室,江苏省 南京市 210023;南京中医药大学,中西医结合学院,江苏省 南京市 210023;南京中医药大学附属南京中医院,江苏省 南京市 2100233.南京中医药大学,骨伤修复与重建新技术实验室,江苏省 南京市 210023;南京中医药大学附属盐城中医院,盐城市中医院,江苏省 盐城市 224000
摘要：背景:中药及其有效成分在调节外泌体miRNA功能方面的潜在作用为骨代谢疾病治疗开辟了新的途径.
目的:探讨温肾通络止痛方通过调控脂肪间充质干细胞来源外泌体miR-342-3p改善骨髓间充质干细胞骨脂分化平衡的作用及机制.
方法:分离培养1周龄SD大鼠脂肪间充质干细胞及骨髓间充质干细胞,温肾通络止痛方含药血清干预脂肪间充质干细胞后超速离心分离外泌体.外泌体与骨髓间充质干细胞共培养48 h后采用碱性磷酸酶染色、茜素红染色和油红O染色评估骨髓间充质干细胞的骨脂分化能力;利用高通量测序筛选差异miRNA,生信分析下游靶基因,用qPCR验证关键miRNA及靶基因表达.采用qPCR评估miR-342-3p及靶基因PDGFRα对骨髓间充质干细胞成骨、成脂分化基因表达的影响;Western blot法检测miR-342-3p及PDGFRα对下游磷脂酰肌醇3激酶/蛋白激酶B通路蛋白表达的影响.
结果与结论:温肾通络止痛方显著促进脂肪间充质干细胞来源外泌体的分泌且更易被骨髓间充质干细胞摄取;测序结果显示温肾通络止痛方干预后的脂肪间充质干细胞来源外泌体中miR-342-3p表达上调最为明显,其通过靶向抑制PDGFRα促进骨髓间充质干细胞成骨分化(Runx2、Osterix mRNA表达上调)并抑制成脂分化(PPARγ、CEBPα mRNA表达下调);miR-342-3p可促进磷脂酰肌醇3激酶、蛋白激酶B磷酸化蛋白表达,激活磷脂酰肌醇3激酶/蛋白激酶B信号通路,调控骨髓间充质干细胞骨脂分化平衡.以上结果表明温肾通络止痛方通过脂肪间充质干细胞外泌体miR-342-3p靶向PDGFRα/磷脂酰肌醇3激酶/蛋白激酶B轴调控骨髓间充质干细胞的骨脂分化平衡,为中药复方防治骨质疏松提供了分子机制依据.
关键词：温肾通络止痛方骨质疏松症骨髓间充质干细胞骨脂平衡脂肪间充质干细胞外泌体miRNA磷脂酰肌醇3激酶蛋白激酶B
分类号：R459.9(治疗学)R394.2(医学遗传学)R285.5(中药学)
论文发表日期：2026-05-08
在线出版日期：2026-03-18（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：12( 3258-3269 )
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