骨髓间充质干细胞神经分化的体内外研究
刘辉
杨树源
只达石
张建宁
杨新宇
1.300052,天津医科大学总医院神经外科2.300052,天津医科大学总医院神经外科3.300052,天津医科大学总医院神经外科4.300052,天津医科大学总医院神经外科5.300052,天津医科大学总医院神经外科
摘要:目的研究骨髓间充质干细胞在体内外向神经细胞分化的潜能.方法(1)分离培养:从水囊引产胎儿的四肢骨中分离培养骨髓基质细胞,再通过贴壁方法将间充质干细胞从骨髓来源的单个核细胞中分离出,利用流式细胞仪进行间充质干细胞免疫表型测定.(2)体外分化观察:将间充质干细胞在二甲基亚砜(DMSO)和丁羟茴醚(BHA)中作用5h后,行神经元特异性烯醇化酶、神经微丝等免疫组化染色.(3)体内分化观察:将用5-溴脱氧尿核苷(BrDU)标记的间充质干细胞通过立体定向的方法移植于顶叶皮质区,然后再行烯醇化酶、神经微丝及胶质纤维酸性蛋白免疫组化染色.结果(1)生物学特性:间充质干细胞贴壁生长,细胞表现为梭形细胞形态,骨髓来源的间充质干细胞CD34、HLA-DR的表达为阴性,而CD44、CD29、CD13的表达为阳性.(2)体外分化:间充质干细胞在体外被DMSO/BHA处理后,胞浆向细胞核方向收缩,形成一个收缩的胞体,外周是细胞膜的突起,呈现出典型的神经元表型,并且免疫组化染色呈现神经元特异性烯醇化酶及神经微丝染色阳性.(3)体内分化:间充质干细胞被立体定向移植后,在移植部位可见BrDU染色阳性的细胞团,同时可见BrDU阳性细胞迁移到周围宿主的皮质中.免疫组化染色显示,在移植物中及邻近宿主皮质中的移植细胞呈神经元标记烯醇化酶染色阳性,星形细胞标记胶质纤维酸性蛋白染色阳性.结论间充质干细胞有能力分化为非间充质细胞,特别是神经元.
关键词:骨髓细胞培养的神经系统免疫组织化学细胞移植
分类号:R74(神经病学与精神病学)
资助基金:天津市科技发展基金(013111211)
论文发表日期:2004-01-01
在线出版日期:2025-08-15(本平台首次上网日期,不代表文献的发表时间)
页数:4( 355-358 )
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