骨桥蛋白剪接变体对胶质瘤细胞侵袭性的影响
钱春发
颜伟
赵鹏
张军霞
李瑞
石磊
孙关
孙利华
钱进
傅震
刘宁
尤永平
摘要：目的 探讨骨桥蛋白(OPN)剪接变体对胶质瘤细胞侵袭性的影响及其作用机制.方法 采用荧光定量聚合酶链反应或逆转录-聚合酶链反应分别检测正常脑组织、WHO Ⅱ～Ⅳ级胶质瘤组织,以及人胶质瘤细胞系U251、U87、SHG44和TJ905骨桥蛋白各剪接变体表达水平;小干扰RNA(siRNA)技术沉默野生型骨桥蛋白,慢病毒质粒表达载体分别导入三种突变型剪接变体OPN-a、OPN-b和OPN-c;细胞体外侵袭实验检测U251和U87细胞体外侵袭力.整合素αvβ3受体抗体和磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)抑制剂LY294002抑制骨桥蛋白的作用,阻断PI3K/Akt信号转导通路.Western blotting法检测侵袭相关蛋白尿激酶型纤溶酶原激活物(uPA)、基质金属蛋白酶-2(MMP-2)和基质金属蛋白酶-9(MMP-9)表达水平,以及丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶AKT磷酸化水平和核因子-κB(NF-κB)p65转录进入细胞核水平,明胶酶谱法检测MMP-2和MMP-9活性.结果 WHOⅢ～Ⅳ级胶质瘤组织,以及U251和U87细胞骨桥蛋白各剪接变体呈高表达,而正常脑组织、WHOⅡ级胶质瘤组织及SHG44和TJ905细胞呈低表达.OPN-a和OPN-c可升高U251和U87细胞AKT磷酸化水平,诱导NF-κB p65转录进入细胞核,提高uPA、MMP-2和MMP-9表达水平,增强MMP-2和MMP-9活性,从而增强胶质瘤细胞侵袭力;OPN-b对胶质瘤细胞侵袭力无明显作用.结论 OPN-a和OPN-c通过激活PI3K/Akt/NF-κB信号转导通路而增强胶质瘤细胞侵袭力.
关键词：骨桥蛋白质剪接体脑肿瘤神经胶质瘤聚合酶链反应衔接蛋白质类信号转导
论文发表日期：2009-01-01
页数：9( 562-570 )
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