慢病毒介导的RNAi敲低hTERT表达对人胶质瘤细胞系U87抑瘤作用的研究
赵鹏
傅震
尤永平
王存祖
陈云祥
陆小明
鲁艾林
刘宁
1.南京医科大学第一附属医院神经外科,2100292.南京医科大学第一附属医院神经外科,2100293.南京医科大学第一附属医院神经外科,2100294.南京医科大学第一附属医院神经外科,2100295.南京医科大学第一附属医院神经外科,2100296.南京医科大学第一附属医院神经外科,2100297.南京医科大学第一附属医院神经外科,2100298.南京医科大学第一附属医院神经外科,210029
摘要：目的 探讨慢病毒介导的RNA干扰(RNAi)敲低人端粒酶逆转录酶(hTERT)表达水平对人胶质瘤细胞系U87的影响.方法 以慢病毒为载体的靶向hTERT小干扰RNA(siRNA)构建体Lt-I直接感染U87细胞,分别以无义序列Lt-non及体外常规培养的U87细胞作为载体对照和空白对照.采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和端粒重复序列扩增(TRAP)法检测肿瘤细胞内源性hTERT表达水平和端粒酶活性,四甲基偶氮唑盐(MTT)法和流式细胞术检测细胞增殖活性和增殖周期,荧光原位杂交法检测端粒长度,Transwell法检测细胞体外侵袭力;同时观察注射慢病毒后裸小鼠皮下移植瘤生长情况.结果 体内外实验结果显示,Lt-I可明显降低肿瘤细胞内源性hTERT表达水平(均P=0.000)和端粒酶活性(均P=0.000);对细胞增殖活性和增殖周期无明显抑制作用(均P>0.05);感染后肿瘤细胞端粒长度无明显变化(均P>0.05);但对肿瘤细胞体外侵袭力(均P=0.000)和裸小鼠皮下移植瘤的生长具有较强抑制作用(均P<0.05).结论 RNAi技术通过抑制肿瘤细胞内源性hTERT表达水平、端粒酶活性和侵袭力而逆转人胶质瘤细胞系U87恶性表型,hTERT可望成为胶质瘤基因治疗的靶点.
关键词：慢病毒属转染RNA小分子干扰端粒末端转移酶脑肿瘤神经胶质瘤基因表达调控基因肿瘤抑制
资助基金：国家自然科学基金(30872657)
论文发表日期：2009-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：7( 571-577 )
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