急性重型颅脑创伤患者外周血微小RNA和白细胞介素-1表达变化及分子机制研究
蒋达锦
王晨秋
吴杰
陈君
李严
1.210019,江苏省苏州明基医院神经外科2.210019,江苏省苏州明基医院神经外科3.210019,江苏省苏州明基医院神经外科4.210019,江苏省苏州明基医院神经外科5.210019,江苏省苏州明基医院神经外科
摘要：目的 探讨急性重型颅脑创伤患者血清白细胞介素-1α和1β(IL-1α和IL-1β)表达变化以及外周血单个核细胞微小RNA(miRNA)相对表达量,并探讨其分子机制.方法 采用生物学信息软件TargetScan Release 7.1分析调控IL-1α和IL-1β基因的miRNA;酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清IL-1α和IL-1β表达变化,逆转录-聚合酶链反应检测外周血单个核细胞miRNA相对表达量;双荧光素酶报告基因载体验证基因之间相互作用.结果 IL-1α是miRNA-24-3p调控的靶基因,1L-1β是miRNA-383-3p调控的靶基因.急性重型颅脑创伤患者血清IL-1α[(4.09±2.32) ng/L对(0.56±0.02) ng/L;t 124.369,P=0.030]和IL-1β[(3.99±1.73) ng/L对(0.89±0.03) ng/L;t=163.123,P=0.010]水平高于正常对照者.急性重型颅脑创伤患者外周血miRNA-24-3p和miRNA-383-3p相对表达量为23％和17％,IL-1α和IL-1β基因相对表达量为390％和420％.双荧光检测显示,各处理组细胞IL-1α基因(F=40 154.000,P=0.000)和IL-1β基因(F=4015.000,P=0.003)表达量差异有统计学意义,其中miRNA-24-3p组细胞IL-1α基因表达量低于空白对照组(P=0.000)、miRNA-24-3p抑制剂组(P=0.023)、阴性对照组(P=0.023)和阴性抑制剂组(P=0.023),miRNA-383-3p组细胞IL-1β基因表达量低于空白对照组(P=0.000)、miRNA-383-3p抑制剂组(P=0.000)、阴性对照组(P=0.000)和阴性抑制剂组(P=0.000);经过转染克隆IL-1 α-mut-3'UTR和IL-1 β-mut-3'UTR质粒后,各处理组细胞IL-1α基因(F=72.400,P=0.001)和IL-1β基因(F=37.000,P=0.000)表达量差异有统计学意义,但miRNA-24-3p组细胞IL-1α基因表达量与空白对照组、miRNA-24-3p抑制剂组、阴性对照组和阴性抑制剂组差异无统计学意义(均P＞ 0.05),miRNA-383-3p组细胞IL-1β基因表达量与空白对照组、miRNA-383-3p抑制剂组、阴性对照组和阴性抑制剂组差异无统计学意义(均P＞0,05).结论 急性重型颅脑创伤患者血清IL-1α和IL-1β水平高于正常对照者,其作用机制可能是IL-1α基因受miRNA-24-3p负性调控、IL-1β基因受miRNA-383-3p的负性调控.
关键词：颅脑损伤微RNAs白细胞介素1基因转染逆转录聚合酶链反应细胞培养的
论文发表日期：2018-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：6( 824-829 )
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