三种不同抗原对小鼠γδT细胞体外扩增的比较
陈小兰1
潘磊1
张京慧1
齐颖1
牟丹蕾2
1.首都医科大学附属北京世纪坛医院老年医学科, 北京,1000382.首都医科大学附属北京佑安医院, 北京,100069
摘要：目的 比较异戊烯焦磷酸(IPP)、热休克蛋白70 (HSP70)和表位肽(EP6)对小鼠脾脏γδT细胞体外扩增的差异.方法 2011年1月-2015年5月于北京协和医院及北京世纪坛医院选取健康雄性SPF级C57 BL/6小鼠32只,分为16组,每组2只.提取并分离小鼠脾脏γδT细胞,分为对照组、IPP组、HSP70组和EP6组,每组再按浓度及干预方式(连续性刺激及单次刺激)的不同进行分组,IPP浓度分为1.25 ng/ml、2.5 ng/ml、5 ng/ml,HSP70浓度分为6.25 μg/ml、12.5 μg/ml、25μg/ml,EP6浓度分为0.05 μg/μl、0.1 μg/μl、0.2μg/μl,连续性刺激即每隔2～3日换液50％并补充所换液体中相应的抗原,单次刺激组即不需补充所换液体中的抗原,共培养10 d.检测对照组与不同浓度抗原、不同干预方式在培养的第0天(D0)、第3天(D3)、第7天(D7)和第10天(D10)的γδT细胞比例.结果 不同浓度的抗原作用γ趼细胞后第3天出现扩增峰值,达峰时抗原由小到大各浓度的增殖百分比分别为:IPP组(5.46％±0.01％、5.23％±0.01％、5.08％±0.08％),HSP70组(7.43％±0.11％、4.48％±0.07％、7.78％±0.07％),EP6组(3.80％±0.10％、6.22％±0.13％、8.42％±0.11％).达峰时IPP组1.25 ng/ml的扩增效果较2.5ng/ml和5.O ng/ml明显升高(5.46％ ±0.01％ vs.5.23％±0.01％、5.08％±0.08％,P＜0.05).3组γδT细胞的扩增效果不随抗原浓度增加而升高,随培养时间的延长而降低.浓度不变干预方式不同时,连续性刺激组和单次刺激组均在第3天出现扩增峰值,连续性刺激组第3天的增殖百分比分别为:IPP组6.38％±0.58％、HSP70组4.27％±0.26％、EP6组5.41％±0.11％;单次刺激组第3天的增殖百分比分别为:IPP组3.60％±0.27％、HSP70组4.54％±0.16％、EP6组3.20％±0.11％;达峰时IPP组和EP6组均出现连续性刺激组扩增百分比大于一次性单次刺激组(P＜0.05).结论 小鼠模型中抗原体外扩增脾脏γδT细胞时,培养后第3天为扩增的达峰时间,且抗原连续性刺激扩增效果优于单次刺激.
关键词：脾脏γδT细胞抗原增殖异戊烯焦磷酸热休克蛋白表位肽小鼠
资助基金：国家自然科学基金(81201294)
论文发表日期：2016-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：6( 52-57 )
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