一氧化氮对辐射诱导的肿瘤细胞凋亡和DNA双链断裂的双向性影响
苏晓明
崔迪
任晔
陈芳
马慧珍
戴卓捷
王宗烨
1.中国人民解放军第306医院放疗中心, 北京,1001012.中国人民解放军第306医院放疗中心, 北京,1001013.中国人民解放军第306医院放疗中心, 北京,1001014.中国人民解放军第306医院放疗中心, 北京,1001015.中国人民解放军第306医院放疗中心, 北京,1001016.中国人民解放军第306医院放疗中心, 北京,1001017.中国人民解放军第306医院放疗中心, 北京,100101
摘要：目的 观察不同浓度的一氧化氮在不同p53基因状态的肿瘤细胞中对射线导致的细胞凋亡和DNA双链断裂的双向性影响.方法 2009年6月—2010年6月于第四军医大学放射医学实验室进行实验.选用p53缺如人非小细胞肺癌H1299细胞,稳定转染野生型p53(wtp53)或突变型p53(mp53)基因,得到H1299/wtp53或H1299/mp53细胞.细胞内质粒载体的稳定表达由RT-PCR和限制性内切酶片段长度多态性分析(RFLP)法检测.细胞先于含不同浓度硝酸异山梨酯(ISDN)的培养基中培养,然后接受X线照射.照射后细胞凋亡和γH2 AX分别由Ho-echst33342染色法和流式细胞术测定.Western blot检测凋亡相关蛋白的表达.结果 在H1299/wtp53和H1299/mp53细胞中,在p53基因7号外显子RT-PCR的产物中可观察到清晰的110 bp条带.p53基因7号外显子用MspI或BsrI限制性内切酶特异性消化后,相应地在H1299/wtp53或H1299/mp53细胞中,可以观察到清晰的70 bp条带.在H1299/wtp53细胞中,低浓度的ISDN(5μmol/L)可显著降低X线辐射诱导的凋亡和DNA双链断裂,而高浓度的ISDN(500μmol/L)却显著升高X线辐射诱导的凋亡和DNA双链断裂.而且,一氧化氮对辐射导致的Caspase-3和Bax介导的凋亡有双向性的影响.但是,对于上述浓度的ISDN,并没有在H1299/mp53细胞中观察到这些现象.结论 在肿瘤细胞中,不同浓度的一氧化氮可双向性影响辐射导致的Bax和Caspase-3介导的凋亡以及DNA双链断裂的变化,并且一氧化氮可通过p53基因表达调控来影响细胞的命运.
关键词：一氧化氮电离辐射p53凋亡DNA双链断裂
资助基金：国家自然科学基金(81402577)
论文发表日期：2017-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：6( 389-394 )
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