小鼠B淋巴瘤细胞系A20核转染的影响因素分析
阳诚
宋远
袁小涵
王惠明
1.430060,武汉大学人民医院肾内科2.430060,武汉大学人民医院肾内科3.430060,武汉大学人民医院肾内科4.430060,武汉大学人民医院肾内科
摘要：目的 分析影响小鼠B淋巴瘤细胞系A20的核转染效率的因素,以提高转染效率.方法 2017年1—6月在武汉大学人民医院中心实验室和肾病实验实进行实验.以绿色荧光蛋白(GFP)作为报告基因,使用Nucleo-fector核酸转染方法分别转染4种外源基因即CD40、ARNO、C-ABL、JLP进入A20细胞,用流式细胞术和荧光显微镜分别检测转染效率,研究细胞转染时间和外源质粒大小对核转染效率的影响.结果 质粒大小在8 kb以下时转染效率均很高,质粒超过8 kb时转染效率较低,其中,ARNO组(目的基因长度为1366 bp)转染效率最高,JLP组(目的基因长度为3976 bp)转染效率最低,转染后4 h检测转染效率最高,48 h时最低.结论 核转染方法非常适合于悬浮细胞的转染.且相对于传统的脂质体转染等方式,核转染的方法能有效缩短转染时间.外源基因过大会导致转染效率低,控制外源基因的大小能有效提高转染效率.
关键词：B淋巴瘤细胞A20核转染质粒
资助基金：国家自然科学基金(81370800)
论文发表日期：2018-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：3( 627-629 )
英文信息