华蟾素通过调控Wnt/β-catenin信号通路和EMT抑制结肠癌侵袭和转移的实验研究
崔旭旭1
刘璐2
张洁3
1.710038 西安,空军军医大学第二附属医院肿瘤科2.710016 西安,西安大兴医院肿瘤科3.712000 陕西咸阳,陕西中医药大学附属医院肿瘤科
摘要：目的 探索华蟾素在结肠癌侵袭和转移中的作用及其机制.方法 于2022年9月-2023年3月在空军军医大学第二附属医院实验室进行实验.使用不同浓度的华蟾素(0、2.5、5、10、20、40、80、160 mg/L)对人结肠癌细胞系HCT 116和人正常结肠上皮细胞系NCM 460进行处理,CCK-8法检测华蟾素对结肠癌细胞和正常结肠上皮细胞增殖的影响.将HCT 116细胞随机分为对照组和华蟾素(80 mg/L)组,干预24 h后光学显微镜下观察细胞形态变化;Annexin V-FITC/PI双染检测细胞凋亡;Transwell实验检测细胞迁移和侵袭;Western blot检测癌细胞转移、上皮—间充质转化(EMT)和Wnt/β-catenin相关蛋白水平.结果 CCK-8检测结果显示,不同浓度的华蟾素处理后,华蟾素对HCT 116细胞的增殖抑制率以剂量和时间依赖的方式逐渐升高(P＜0.001),24 h半抑制浓度(IC50)为80 mg/L,而对正常结肠上皮细胞NCM 460的增殖能力无影响.对照组HCT 116细胞状态良好,而华蟾素组细胞贴壁能力下降,分泌物增多,形态皱缩呈圆形上皮细胞样表型,伴随不同程度细胞膜破裂;流式细胞术结果显示,华蟾素处理24、48 和 72 h 后,HCT 116 细胞凋亡率分别较处理 0 h 时显著增加(t/P=17.222/＜0.001、17.041/＜0.001、23.651/＜0.001);Transwell实验结果显示,华蟾素组HCT 116细胞的迁移和侵袭细胞数较对照组明显降低(t/P=52.754/＜0.001、7.584/0.002);Western blot结果显示,与对照组比较,华蟾素组细胞中MMP-2和MMP-9表达降低,上皮标志物E-cadherin 表达增加,而间充质标志物 N-cadherin 和 Snail 表达减少,Wnt3a、β-catenin、c-myc、cyclin D1 和 MMP-7 蛋白水平均下调,而 APC 蛋白水平上调(t/P=8.908/0.001、29.394/0.001、36.406/0.001、12.860/0.001、14.203/0.001、27.862/0.001、20.176/0.001、24.012/0.001、37.245/0.001、33.627/0.001、6.971/0.002).结论 华蟾素能够抑制结肠癌细胞侵袭和转移,其机制可能与抑制EMT和阻断Wnt/β-catenin信号通路有关.
关键词：结肠癌华蟾素上皮—间充质转化Wnt/β-catenin信号通路侵袭转移
分类号：R735.3+5(消化系肿瘤)
论文发表日期：2024-12-18
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：6( 1507-1512 )
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