RIP3、HMGB1在HK-2细胞程序性坏死中的表达及作用研究
曹彦卫
张世球
王川玲
俞容
朱永俊
570102 海口,海南医科大学第一临床医学院肾内科
摘要：目的 构建人肾小管上皮(HK-2)细胞程序性坏死的模型,观察受体相互作用蛋白3(RIP3)、高迁移率族蛋白1(HMGB1)在HK-2细胞程序性坏死中的表达和作用机制.方法 于2022年5月-2024年1月在海南医科大学实验室进行实验.取HK-2细胞,分为control组、TNF-α组、TNF-α+Nec-1s组、TNF-α+GSK'872组、TNF-α+NSA组,分别给予相应干预.采用流式细胞术检测各组细胞凋亡、坏死率;TUNEL+RIP3荧光双染色结合激光共聚焦显微成像检测TUNEL+RIP3阳性细胞百分率;ELISA法检测HMGB1蛋白表达水平;qRT-PCR检测RIP3、HMGB1 mRNA表达水平;Western blot检测RIP3、HMGB1蛋白表达水平.结果 与control组比较,TNF-α组HK-2细胞凋亡和坏死率、TUNEL+RIP3双阳性细胞百分率、HMGB1蛋白表达量及RIP3、HMGB1 mRNA和蛋白表达水平显著升高(q/P=56.786/＜0.001、47.963/＜0.001、24.186/＜0.001、5.020/0.034、4.708/0.047、46.495/＜0.001、26.837/＜0.001).与TNF-α组比较,TNF-α+Nec-1s组、TNF-α+GSK'872组、TNF-α+NSA组HK-2细胞凋亡和坏死率显著降低(q/P=44.243/＜0.001、37.666/＜0.001、30.324/＜0.001),TUNEL+RIP3 双阳性细胞百分率显著降低(q/P=35.176/＜0.001、28.461/＜0.001、21.104/＜0.001),HMGB1 蛋白表达量显著降低(q/P=39.043/＜0.001、39.412/＜0.001、41.510/＜0.001),RIP3 mRNA 表达显著降低(q/P=13.982/＜0.001、5.386/0.022、8.811/＜0.001),HMGB1 mRNA 表达显著降低(q/P=7.219/0.003、6.318/0.008、4.658/0.049),RIP3 蛋白表达显著降低(q/P=62.436/＜0.001、46.495/＜0.001、39.853/＜0.001),HMGB1 蛋白表达显著降低(q/P=20.982/＜0.001、20.006/＜0.001、28.301/＜0.001).TNF-α+Nec-1s 组、TNF-α+GSK'872 组、TNF-α+NSA 组两两比较,HK-2 细胞凋亡和坏死率、TUNEL+RIP3双阳性细胞百分率、RIP3蛋白表达水平差异均有统计学意义(P＜0.05).结论 TNF-α能诱导HK-2细胞发生RIP3介导的程序性坏死并释放HMGB1分子.
关键词：程序性坏死肿瘤坏死因-α受体相互作用蛋白3高迁移率族蛋白1
分类号：R692.5(泌尿科学（泌尿生殖系疾病）)
论文发表日期：2025-02-17
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
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