P22077通过下调β-catenin通路改善小鼠肺纤维化的作用机制研究
胡蝶1
赵东2
黄吉桢2
吴磊3
1.430065 武汉,武汉科技大学医学部公共卫生学院劳动卫生与环境卫生学教研室/职业危害识别与控制湖北省重点实验室;430060 武汉,武汉大学人民医院呼吸与危重症医学科2.430060 武汉,武汉大学人民医院呼吸与危重症医学科3.430065 武汉,武汉科技大学医学部公共卫生学院劳动卫生与环境卫生学教研室/职业危害识别与控制湖北省重点实验室
摘要：目的 观察泛素特异性蛋白酶7(USP7)抑制剂P22077对肺泡上皮细胞上皮—间质转化(EMT)和小鼠肺纤维化的影响及机制.方法 于2023年10月—2024年12月在武汉大学人民医院中心实验室进行实验.将40只C57BL/6小鼠采用随机数字表法分为对照组(Control组)、模型组(Blm组)、P22077-L组、P22077-H组,各10只.通过在气管内滴注博来霉素(Blm)建立小鼠肺纤维化模型(2 mg/kg),第7 d起分别在P22077-L组(10 mg·kg-1·d-1)、P22077-H组(15 mg·kg-1·d-1)小鼠腹腔内注射不同剂量的P22077,第28 d获取小鼠肺泡灌洗液和肺组织.HE染色、Masson染色观察小鼠肺组织病理形态学变化;Western blot法检测肺组织中USP7、β-连环蛋白(β-catenin)、E-钙黏蛋白(E-cadherin)、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)表达;免疫组织化学染色检测小鼠肺组织E-cadherin、α-SMA表达;ELISA检测小鼠肺泡灌洗液中炎性因子[转化生长因子-β1(TGF-β1)、白介素-1β(IL-1β)、IL-6、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)]水平.细胞实验分为对照组、模型组、P22077组,用TGF-β1(10 μg/L)处理小鼠肺泡上皮细胞系(MLE12)构建细胞模型,P22077组在TGF-β1处理的基础上加用P22077(10 μmol/L),收集细胞后通过Western blot法检测USP7、β-catenin、E-cadherin、α-SMA表达.结果 与Blm组比较,HE染色、Masson染色结果显示P22077可呈剂量依赖性的减少肺组织炎性反应和纤维化.与Blm组比较,P22077-H组小鼠肺组织中USP7、β-catenin和α-SMA蛋白水平明显减少,而E-cadherin蛋白水平明显增加,肺泡灌洗液中炎性因子表达下调(P＜0.05).在细胞实验中,与TGF-β1组比较,P22077组MLE12细胞中USP7、β-catenin和α-SMA表达明显减少,而E-cadherin表达明显增加(P＜0.05).结论 P22077可以有效抑制肺泡上皮细胞EMT,并改善小鼠肺纤维化,这一效应与β-catenin通路的下调有关.
关键词：肺纤维化肺泡上皮细胞P22077泛素特异性蛋白酶7β-连环蛋白上皮—间质转化小鼠
分类号：R563(呼吸系及胸部疾病)
论文发表日期：2025-10-18
在线出版日期：2025-11-10（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：7( 1241-1247 )
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