LncRNA RMRP通过靶向调控miR-580-3p/RhoA轴抑制脂多糖诱导的肾小管上皮细胞损伤
韩玲芝1
张雪1
卢祥云1
刘堃1
邵春芝2
1.266300 山东省青岛市胶州中心医院肾病内科2.266300 山东省青岛市胶州中心医院感染性疾病科
摘要：目的 探讨长链非编码核糖核酸(LncRNA)线粒体RNA加工核糖核酸内切酶RNA组分(RMRP)是否可通过靶向调控微小核糖核酸(miR)-580-3p/Ras同源基因家族成员A(RhoA)轴抑制脂多糖(LPS)诱导的肾小管上皮细胞损伤.方法 于2024年5-10月在青岛市胶州中心医院中心实验室进行实验.将体外正常培养的人肾小管上皮细胞HK-2记为对照(Control)组,使用LPS建立细胞损伤模型,根据不同处理方式分为模型(Model)组、sh-NC组、sh-RMRP 组、sh-RMRP+anti-NC 组、sh-RMRP+anti-miR-580-3p 组.实时荧光定量 PCR(qRT-PCR)检测 LncRNA RMRP、miR-580-3p、RhoA mRNA 表达;双荧光素酶实验检测 LncRNA RMRP 与 miR-580-3p、miR-580-3p 与 RhoA 调控关系;细胞计数试剂盒-8(CCK8)实验检测细胞增殖;酶联免疫吸附试验(ELISA)检测白介素-1β(IL-1β)、白介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平;流式细胞仪检测细胞凋亡;蛋白免疫印迹(WB)检测RhoA、增殖细胞核抗原(PCNA)、B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)表达.结果 与Control组比较,Model组中LncRNA RMRP、RhoA mRNA及蛋白表达、细胞凋亡率、IL-1β、IL-6、TNF-α、Bax蛋白表达升高,miR-580-3p、HK-2细胞存活率、PCNA、Bcl-2 蛋白表达降低(P＜0.01);与 Model 组、sh-NC 组比较,sh-RMRP 组 LncRNA RMRP、RhoA mRNA 及蛋白表达、细胞凋亡率、IL-1 β、IL-6、TNF-α、Bax表达降低,miR-580-3p、HK-2细胞存活率、PCNA、Bcl-2蛋白表达升高(P＜0.01);与 sh-RMRP 组、sh-RMRP+anti-NC 组比较,sh-RMRP+anti-miR-580-3p 组中 RhoA mRNA 及蛋白表达、细胞凋亡率、IL-1β、IL-6、TNF-α、Bax蛋白表达升高,而miR-580-3p、HK-2细胞存活率、PCNA、Bcl-2表达降低(P＜0.01);双荧光素酶实验显示,与mimic-NC组比较,miR-580-3p mimic组转染WT-RMRP、WT-RhoA的荧光素酶活性降低(P＜0.01).结论 敲低LncRNA RMRP可通过靶向调控miR-580-3p/RhoA轴抑制LPS诱导的HK-2细胞炎性反应及细胞凋亡,从而发挥抑制肾小管上皮细胞损伤的作用.
关键词：急性肾损伤肾小管上皮细胞LncRNA RMRPmiR-580-3p/RhoA轴脂多糖
分类号：R692(泌尿科学（泌尿生殖系疾病）)
论文发表日期：2025-11-18
在线出版日期：2025-12-05（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：9( 1369-1377 )
英文信息