人成釉蛋白编码区cDNA的克隆和N端肽的融合表达
田宇
肖明振
倪龙兴
余擎
鲁红
1.第四军医大学口腔医学院,陕西,西安,7100322.第四军医大学口腔医学院,陕西,西安,7100323.第四军医大学口腔医学院,陕西,西安,7100324.第四军医大学口腔医学院,陕西,西安,7100325.第四军医大学口腔医学院,陕西,西安,710032
摘要：目的:克隆人成釉蛋白(Ameloblastin)编码区基因并原核表达其N端肽.方法:抽提人牙胚总RNA,用Oligo(dt)作引物逆转录合成人牙胚cDNAs,然后利用PCR方法,从cDNAs中扩增出人成釉蛋白编码区cDNA序列,将所得基因片段插入pGEM-T Easy质粒载体,转化入大肠杆菌DH5α后挑选阳性克隆,提取重组质粒DNA,通过限制性酶切和核苷酸序列测定鉴定阳性克隆.将所克隆序列的5'端558bp的片段连入原核表达载体pGEX-4T1并在大肠杆菌中诱导表达,SDS-PAGE分析.结果:克隆片段测序结果与GenBank数据库收录的序列一致,经诱导表达见Mr为46×103的融合蛋白.结论:克隆到人成釉蛋白编码区cDNA,并在大肠杆菌中表达了人成釉蛋白N端肽.
关键词：成釉蛋白cDNA聚合酶链反应
分类号：Q785(基因工程（遗传工程）)Q786(基因工程（遗传工程）)R780.2(口腔病理学)
资助基金：全军重点项目(012089)
论文发表日期：2002-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：3( 172-174 )
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