大鼠磨牙牙根发育相关基因mrp1的克隆及其原核表达载体的构建
邢向辉1
金岩2
文玲英3
轩东英2
刘青2
杜岩2
1.第四军医大学口腔医学院;第四军医大学组织工程实验中心,陕西,西安,7100322.第四军医大学组织工程实验中心,陕西,西安,7100323.第四军医大学口腔医学院
摘要：目的:从大鼠磨牙胚组织中克隆大鼠磨牙牙根发育相关基因mrp1,构建原核融合表达载体,利用大肠杆菌表达其C端肽.方法:从生后3 d SD大鼠仔鼠磨牙胚中提取总mRNA,通过RT-PCR扩增出mrp1C端肽段基因并克隆进中间载体,然后将插入基因克隆入GST融合表达载体pGEX-4T-1,以大肠杆菌DH5α为宿主菌,在28℃下进行IPTG诱导.结果:克隆载体序列酶切鉴定、序列测定完全正确;含重组质粒的工程菌经诱导后在SDS-PAGE上出现一条新生蛋白带,Mr为36×103,与预期C端肽Mr大小一致,约占菌体总蛋白的19%.结论:成功地鉴定了mrp1C端肽段基因,通过基因克隆构建了其原核表达载体pGEX-4T-mrp1,并在大肠杆菌中得到了高效表达.
关键词：mrp1原核表达牙根发育
分类号：R785(口腔科学)
资助基金：教学改革项目(CXO2F002)
论文发表日期：2005-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：4( 68-71 )
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