人β防御素3重组表达的优化
宋玮1
石勇2
闫金方3
田宇3
肖明振
1.广州军区联勤部门诊部,广东,广州,5100802.省口腔医院,广东,广州,5102803.第四军医大学口腔医院,陕西,西安,710032
摘要：目的:通过对β防御素3(HBD3)重组表达实验方法的改进,获得大量有活性的重组人β防御素3(rhBD3),为抗菌肽rhBD3的获得提供新的实验依据.方法:将构建好的原核表达质粒pET32a,/hBD3在E.coli BL21(DE3)中表达,筛选HBD3优化表达条件,并对其抗菌活性进行评价.结果:含有重组质粒的菌株经IPTG诱导后,表达产物经SDS-PAGE显示在约26 kD处看到预期的条带;对不同诱导时间、温度、IPTG浓度时融合蛋白表达率分析的结果表明:rhBD3在35℃、0.6 mmoL/L IPTG、诱导6 h表达量分别达高峰.表达蛋白纯化后,带His-Tag的重组hBD3融合蛋白和酶切纯化的重组hBD3的体外抑菌试验结果显示,该蛋白对金黄色葡萄球菌和大肠杆菌均有抗菌活性.结论:通过基因工程方法,在本实验设定的表达条件下,可以制备出大量具有抑菌活性的rhBD3,为今后rhBD3的研究应用提供实验基础.
关键词：人β防御素3基因克隆重组表达优化表达
分类号：R780.2(口腔病理学)
论文发表日期：2011-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
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