Smad3调控成釉细胞Amelotin启动子转录活性的研究
许针针1
张莉2
王玉敏2
李东亮2
高艳1
高玉光3
1.山东 滨州256603:1. 滨州医学院附属医院口腔科2.滨州医学院口腔医学院3.山东 滨州256603:1. 滨州医学院附属医院口腔科; 滨州医学院口腔医学院
摘要：目的：：研究Smad3对Amelotin启动子转录活性的影响。方法：用基因克隆技术获得含有不同长度Amelotin启动子片段的荧光素酶报告基因载体,然后将其与Smad3瞬时转染小鼠成釉细胞,并用双荧光素酶报告基因检测其活性；生物学信息软件对人和小鼠的Amelotin基因启动子序列的同源性进行BLAST分析；凝胶迁移实验( EMSA)观察Smad3和Amelotin启动子特异性结合位点之间的相互作用；基因定点突变构建Smad3结合位点突变型Amelotin启动子,并用双荧光素酶报告基因检测系统分析Smad3对野生型和突变型Amelotin启动子转录活性的影响。结果：Smad3转染后, Amelotin启动子(-160~+196)转录活性明显增强(P<0.05)；将人与小鼠的Amelotin启动子序列(-160~+196)进行Blast序列比对,发现两序列在(-160~-1)具有很大的同源性；EMSA结果显示,Smad3与Amelotin启动子(-160~+196)的GTCTG有相互作用；将Amelotin启动子上Smad3结合位点特征性序列“GTCTG”突变为“CCCTG”后,Smad3对突变型Amelotin基因启动子的转录活性无显著影响(P>0.05)。结论：转录因子Smad3可通过与Amelotin启动子特定序列结合而调控Amelotin的基因表达,从而在釉质发育过程中发挥重要作用。
关键词：Smad3AmelotinEMSA双荧光素酶报告基因检测
分类号：R780.2(口腔病理学)
资助基金：国家自然科学基金(81170927)
论文发表日期：2015-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：6( 329-334 )
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