抗牙龈卟啉单胞菌卵黄抗体的制备、纯化和生物学特性鉴定
董瑶1
徐燕1
马倩2
孟明理1
沈继龙3
徐振山2
宋礼华2
1.安徽 合肥230032 安徽医科大学口腔医学院 安徽医科大学附属口腔医院牙周黏膜科 安徽省口腔疾病研究中心实验室2.安徽 合肥230032 安徽安科生物工程(集团)股份有限公司3.安徽 合肥230032 安徽医科大学人兽共患病安徽省重点实验室
摘要：目的:制备特异性抗牙龈卟啉单胞菌( Pg)的鸡卵黄免疫球蛋白( IgY)并检测其生物学特性. 方法:厌氧培养牙龈卟啉单胞菌,将甲醛灭活的菌体经翅膀下浅层肌肉免疫150日龄罗曼母鸡3次,每次间隔10 d. 取鸡蛋用两步硫酸铵沉淀法提取IgY,BCA法测定蛋白质含量,ELLSA法检测纯化后IgY的特异性和抗体效价变化,并进行 SDS-PAGE 和 Western blotting 分析. 观察抗 Pg-IgY 对红细胞凝集的抑制作用.结果:经3次免疫后,抗体滴度最高可达25 600,纯化后每个鸡蛋可得约70 mg IgY抗体;SDS-PAGE分析,纯化的IgY有1条主要蛋白带,相对分子质量( Mr)为180 kD,纯度为65%; Western blotting分析, 该IgY抗体可识别抗原Pg. 每孔3. 125 μg Pg-IgY可有效抑制Pg的红细胞凝集活性;1 mg/mL Pg-IgY可有效抑制Pg生长.结论:本研究得到的IgY特异性强,产量和纯度高.
关键词：牙龈卟啉单胞菌免疫球蛋白Y卵黄抗体
分类号：R780.2(口腔病理学)
资助基金：安徽省自然科学基金(1308085MH130)安徽省自然科学基金(1408085MKL28)安徽省安科生物校企合作项目(K2015011)
论文发表日期：2015-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：7( 459-464,497 )
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