嵌合体真核表达质粒pVAX1-SPG的构建及表达研究
王怡丹1
孙天瞳2
刘建国3
柴巧学2
曲云鹏2
于晓光2
白国辉3
田源3
韩琪2
1.遵义市第一人民医院口腔科，贵州遵义 563002; 贵州省高等学校口腔疾病研究特色重点实验室 遵义市口腔疾病研究重点实验室，5630992.遵义医学院口腔医学院口腔内科学教研室,5630993.遵义医学院口腔医学院口腔内科学教研室，563099; 贵州省高等学校口腔疾病研究特色重点实验室 遵义市口腔疾病研究重点实验室，563099
摘要：目的：构建含变异链球菌表面蛋白SpaP的P区编码基因spap-P和葡聚糖结合蛋白GbpA的葡聚糖结合区编码基因gbd的嵌合体真核表达质粒pVAX1-SPG,并观察其在哺乳动物细胞293T中的表达。方法：通过基因工程技术构建嵌合体真核表达质粒pVAX1-SPG,并采用脂质体转染法将其转染至293T细胞中；然后分别采用免疫组化SABC法和Western-blot检测嵌合蛋白SpaP/P-GBD在真核细胞中的表达。结果：重组真核表达质粒pVAX1-SPG经酶切、测序鉴定证实,其所携带的外源基因片段为2.4 kb的目的基因片段,序列同源性为99%；免疫组化染色结果显示,经pVAX1-SPG转染的293T细胞胞质呈棕褐色染色；Western-blot检测结果显示,分子量为72 kDa的嵌合蛋白SpaP/P-GBD能够被正确表达。结论：构建成功的嵌合体真核表达质粒pVAX1-SPG能在真核细胞293T中正确表达目的蛋白。
关键词：变异链球菌表面蛋白抗原葡聚糖结合蛋白哺乳动物细胞真核表达
分类号：R780.2(口腔病理学)
资助基金：贵州省高等学校重点学科建设项目(SZXK-201207-04)
论文发表日期：2015-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：6( 645-650 )
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