OTUB1基因对宫颈癌Hela细胞顺铂敏感性的影响及机制
肖又德
周树良
庄亚飞
刘印印
周福祥
周云峰
1.武汉大学中南医院肿瘤放化疗科/湖北省肿瘤生物学行为重点实验室/湖北省肿瘤医学临床研究中心,湖北武汉,4300712.武汉大学中南医院肿瘤放化疗科/湖北省肿瘤生物学行为重点实验室/湖北省肿瘤医学临床研究中心,湖北武汉,4300713.武汉大学中南医院肿瘤放化疗科/湖北省肿瘤生物学行为重点实验室/湖北省肿瘤医学临床研究中心,湖北武汉,4300714.武汉大学中南医院肿瘤放化疗科/湖北省肿瘤生物学行为重点实验室/湖北省肿瘤医学临床研究中心,湖北武汉,4300715.武汉大学中南医院肿瘤放化疗科/湖北省肿瘤生物学行为重点实验室/湖北省肿瘤医学临床研究中心,湖北武汉,4300716.武汉大学中南医院肿瘤放化疗科/湖北省肿瘤生物学行为重点实验室/湖北省肿瘤医学临床研究中心,湖北武汉,430071
摘要：目的 研究去泛素化酶OTUB1基因对宫颈癌Hela细胞株顺铂敏感性的影响及可能的机制.方法 用慢病毒包装的干扰质粒(SH组)和阴性对照质粒(NC1组)、过表达质粒(OE组)和相应的阴性对照质粒(NC2组)分别转染宫颈癌Hela细胞,建立稳转细胞系.用实时定量PCR(RT-PCR)法及Western blot法验证OTUB1基因的表达效率;用CCK8法检测细胞增殖;用半数抑制浓度(IC50)、克隆形成评价Hela细胞对顺铂的化疗敏感性;用流式细胞仪检测顺铂作用后的细胞调亡情况;用Western blot法检测凋亡相关蛋白P53、活性Caspase 3和Caspase 8的表达情况.结果 RT-PCR和Western blot结果提示稳转细胞系已建成.使用顺铂处理后,各组细胞抑制率随着药物浓度增加而升高.其中,OE组抑制率明显比NC2高,SH组抑制率低于NC1组(P＜0.05).IC50和克隆形成结果提示OTUB1基因的表达可以增加Hela细胞对顺铂的敏感性(P＜0.05).流式细胞仪结果提示OTUB1基因的表达可以促进细胞凋亡(P＜0.05).Western blot检测进一步发现过表达OTUB1基因细胞中P53、活性Caspase 3和Caspase 8蛋白表达升高(P＜0.05).结论 OTUB1基因表达可以增加Hela细胞对顺铂的化疗敏感性,这可能与去泛素化酶OTUB1蛋白促进细胞凋亡有关.
关键词：Hela细胞OTUB1基因去泛素化酶顺铂细胞凋亡
分类号：R711.74(妇科学)
资助基金：国家自然科学基金资助项目(81472799)
论文发表日期：2017-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：6( 213-216,232,封3 )
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