WTAP通过调控ACSL4 m6A甲基化促进脂多糖诱导人肾小管上皮细胞铁死亡的研究
张琴1
唐庆2
陈兵阳1
1.成都市第七人民医院重症医学科(成都 610213)2.成都市第七人民医院呼吸内科(成都 610213)
摘要：目的 探讨Wilms肿瘤1相关蛋白(WTAP)在脂多糖(LPS)诱导人肾小管上皮细胞(HK-2)铁死亡中的作用及分子机制.方法 基于GEO数据库分析WTAP和长链酯酰辅酶A合成酶4(ACSL4)在急性肾损伤和健康对照组织中的表达差异.采用10 μg/mL LPS处理HK-2细胞,检测细胞活性、凋亡、活性氧(ROS)水平、谷胱甘肽(GSH)和Fe2+含量,并通过Western blotting检测GPX4、ACSL4和WTAP的蛋白表达.采用MeRIP-qPCR检测ACSL4的m6A甲基化水平.利用si-RNA和质粒构建WTAP基因干扰与ACSL4过表达的细胞模型,检测ACSL4与WTAP的结合,以及ACSL4过表达对细胞损伤和铁死亡的影响.结果 与健康对照组相比,急性肾损伤组织中WTAP和ACSL4的表达显著上调.LPS处理以时间依赖性方式降低HK-2细胞活性,促进细胞凋亡,降低GSH含量,提升Fe2+和ROS水平,并降低GPX4表达,同时上调WTAP和ACSL4的蛋白表达以及ACSL4的m6A甲基化水平.敲低WTAP后,ACSL4的蛋白表达和m6A甲基化水平下降,ACSL4和WTAP的结合能力降低,并且ACSL4的mRNA稳定性减弱.与LPS组相比,LPS+si-WTPA组HK-2细胞活性升高,凋亡和铁死亡水平降低,而ACSL4过表达逆转了 si-WTAP对HK-2细胞的保护作用.结论 WTAP通过促进ACSL4的m6A甲基化修饰,上调ACSL4表达,进而促进LPS诱导的HK-2细胞铁死亡和细胞损伤.
关键词：Wilms肿瘤1相关蛋白长链酯酰辅酶A合成酶4N6-甲基腺苷铁死亡脓毒症
分类号：R631(外科感染)R692.5(泌尿科学（泌尿生殖系疾病）)
论文发表日期：2025-07-25
在线出版日期：2025-08-21（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：9( 827-835 )
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