基于三叉神经节神经元电生理特征的单细胞转录组测序技术方法构建
李腊梅1
杨晶2
刘苑莹1
史云欣1
胡文超3
解柔刚4
姜鸣5
1.延安大学生命科学学院多肽资源药物研究中心,陕西省区域生物资源保育与利用工程技术研究中心,陕西延安716099;空军军医大学基础医学院神经生物学教研室,陕西西安7100322.西安国际医学中心心脏病医院,陕西西安7101093.空军军医大学基础医学院神经生物学教研室,陕西西安710032;空军军医大学基础医学院学员六大队,陕西西安7100324.空军军医大学基础医学院神经生物学教研室,陕西西安7100325.延安大学生命科学学院多肽资源药物研究中心,陕西省区域生物资源保育与利用工程技术研究中心,陕西延安716099
摘要：目的 建立小鼠三叉神经节(TRG)神经元电生理特征匹配单细胞转录组测序(scRNA-seq)技术方法.方法 制备小鼠TRG标本,通过膜片钳技术检测并记录神经元电活动特征.记录完成后的神经元细胞,用玻璃微电极获取并收集,进行scRNA-seq分析.结果 膜片钳记录到小鼠TRG神经元中73％的中大型神经元具有特征性放电模式,给予去极化的方波刺激只诱发产生单个动作电位,具有较高的基强度(800.00±129.10)pA,给予斜波刺激不能诱发动作电位.将这种放电特征的神经元细胞通过膜片钳记录电极获取并收集后进行单细胞转录测序,结果显示该方法获取的单细胞符合测序要求,进一步测序分析该类神经元的基因表达分布,发现与神经元兴奋性相关的Na+和K+通道相关基因表达比例无明显差异,其中Na+通道中Navβ1为主要类型.结论 本研究成功建立了 TRG神经元电活动检测匹配scRNA-seq技术方法,并为感觉神经元电活动检测匹配转录组学特征的研究提供了重要工具.
关键词：三叉神经节神经元电活动单细胞转录组测序
分类号：R338(人体生理学)
资助基金：国家自然科学基金(82171212)国家自然科学基金(81870867)国家自然科学基金(81400949)
论文发表日期：2022-08-28
在线出版日期：2026-08-26（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：8( 939-945,951 )
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