己酮可可碱对叔丁基过氧化氢诱导的人脐静脉内皮细胞损伤的保护作用
刘萌萌1
赵晨茜2
郭鹏3
刘江正2
孔德钦2
任晓婷2
刘瑞2
海春旭2
张晓迪2
1.武警后勤学院卫生勤务系,天津300309;空军军医大学军事预防医学系军事毒理学与防化医学教研室,陕西省自由基生物学与医学重点实验室,特殊作业环境危害评估与防治教育部重点实验室,陕西西安7100322.空军军医大学军事预防医学系军事毒理学与防化医学教研室,陕西省自由基生物学与医学重点实验室,特殊作业环境危害评估与防治教育部重点实验室,陕西西安7100323.武警后勤学院卫生勤务系,天津300309
摘要：目的 探讨己酮可可碱(PTX)对叔丁基过氧化氢(t-BHP)诱导的人脐静脉内皮细胞(HUVECs)氧化应激和线粒体功能的影响.方法 利用t-BHP诱导建立HUVECs损伤模型,PTX预处理筛选合适的干预剂量;Mito Tracker Green、Mito SOX和Rho 123探针分别检测线粒体质量、活性氧(ROS)和膜电位的改变;设置对照组、t-BHP组、PTX预处理组和单纯PTX组,对照组细胞不做处理,t-BHP组细胞用105 μmol/L t-BHP处理,单纯PTX组用1 mg/L PTX处理,PTX预处理组用105 μmol/L t-BHP和1 mg/L PTX共同处理.采用MTT法检测细胞的活力;试剂盒检测乳酸脱氢酶(LDH)、丙二醛(MDA)、氧化型谷胱甘肽(GSSG)、还原型谷胱甘肽(GSH)和三磷酸腺苷(ATP)的含量以及超氧化物歧化酶(SOD)的活力;Western blotting法检测细胞中SOD1、SOD2和核转录因子相关因子2(Nrf-2)蛋白表达水平;定磷法检测HUVECs细胞Na+,K+-ATPase和Ca2+,Mg2+-ATPase的活力.结果 霍恩氏法计算并测得HUVECs在t-BHP暴露6 h的半数致死量为105 μmol/L;PTX预处理12 h、浓度大于1 mg/L即可升高HUVECs细胞活力(P＜0.05);与对照组相比,t-BHP处理后,Mito Tracker Green和Rho 123绿色荧光强度下降,Mito SOX红色荧光强度升高;与t-BHP组相比,PTX预处理组能提高HUVECs细胞活力,降低细胞培养上清中LDH、MDA和GSSG水平,细胞中SOD活力以及Nrf-2蛋白表达水平(P＜0.05),升高HUVECs培养上清中GSH水平和GSH/GSSG比值、细胞中SOD1蛋白表达水平、ATP水平以及Na+,K+-ATPase和 Ca2+,Mg2+-ATPase 活力(P＜0.05).结论 PTX 对 t-BHP 诱导的 HUVECs 氧化应激和线粒体损伤有保护作用.
关键词：叔丁基过氧化氢氧化应激己酮可可碱线粒体
分类号：R285(中药学)
资助基金：国家自然科学基金(32100996)军事医学创新工程专项(16CXZ021)武警后勤学院基础研究项目(WHJ202015)
论文发表日期：2023-03-28
在线出版日期：2026-08-26（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：6( 210-215 )
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