miR-16-5p通过靶向SPARC促进人瘢痕疙瘩成纤维细胞凋亡的研究
闫柄文
张仔昂
薛萍
空军军医大学西京医院整形外科,陕西西安710032
摘要：目的 探究miR-16-5p对人瘢痕疙瘩成纤维细胞(KFB)凋亡的作用及机制.方法 利用实时PCR技术检测人正常皮肤成纤维细胞(NFB)和KFB中miR-16-5p水平;利用细胞转染分别将miR-16-5p的对照序列(对照组)、miR-16-5p的模拟物序列(模拟物组)、miR-16-5p的互补序列(抑制物组)转染入KFB后,利用荧光显像技术和实时PCR技术检测转染效果;利用流式细胞仪和形态学手段评估各组KFB凋亡情况;利用Western blotting技术检测各组KFB凋亡相关蛋白含量;利用荧光素酶报告基因技术和Western blotting技术验证miR-16-5p的下游靶基因.结果 与NFB相比,KFB中miR-16-5p低表达;与对照组相比,模拟物组KFB内miR-16-5p含量增加(P＜0.05),抑制物组KFB内miR-16-5p含量降低(P＜0.01);与对照组相比,模拟物组KFB凋亡增加,抑制物组KFB凋亡减少(均P＜0.05);与对照组相比,模拟物组KFB中Caspase-3和Bax表达增加,而Bcl-2表达减少;抑制物组KFB中Caspase-3和Bax表达减少,而Bcl-2表达增加(均P＜0.05);与对照组相比,模拟物组抑制富含半胱氨酸的酸性分泌蛋白基因(SPARC)3'UTR质粒的荧光素酶活性(P＜0.05);与对照组相比,模拟物组KFB中SPARC蛋白低表达,而抑制物组KFB中SPARC蛋白高表达(P＜0.05).结论 miR-16-5p在KFB中低表达,miR-16-5p可通过靶向SPARC促进KFB的凋亡.
关键词：人瘢痕疙瘩成纤维细胞凋亡微小RNA富含半胱氨酸的酸性分泌蛋白
分类号：R622(整形外科学（修复外科学）)
资助基金：国家自然科学基金(82102355)
论文发表日期：2023-07-28
在线出版日期：2026-08-26（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：6( 655-660 )
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