PRMT5调控m6A修饰介导三阴性乳腺癌细胞对多柔比星敏感性的机制研究
樊聪1
汪家佳2
王廷1
张健2
1.空军军医大学西京医院甲状腺乳腺血管外科,陕西西安 7100322.空军军医大学西京医院消化系肿瘤整合防治全国重点实验室,空军军医大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室,陕西西安 710032
摘要：目的 探讨蛋白精氨酸甲基转移酶5(PRMT5)通过调控RNA m6A修饰降低三阴性乳腺癌细胞对多柔比星(DOX)敏感性的分子机制.方法 利用TCGA数据库分析PRMT5在乳腺癌组织中的表达水平及其与患者预后的相关性;构建稳定过表达和敲降PRMT5的人乳腺癌MDA-MB-231细胞株;利用CCK-8和克隆形成实验,分析PRMT5对乳腺癌细胞DOX敏感性的影响;通过qRT-PCR和Western blotting等方法,检测在DOX作用下PRMT5对MDA-MB-231细胞m6A相关分子表达水平的影响;利用MeRIP-seq测序分析PRMT5调控DOX作用下m6A修饰显著差异的靶基因,并通过qRT-PCR检测靶基因的表达水平以及RNA稳定性.结果 TCGA数据库分析结果显示,PRMT5在包括乳腺癌在内的多种肿瘤中高表达(P＜0.05),并且高表达PRMT5预示不良预后;过表达PRMT5能够降低MDA-MB-231细胞对DOX的敏感性(P＜0.01),敲降或者采用PRMT5抑制剂JNJ能显著增加MDA-MB-231细胞对DOX的敏感性(P＜0.01,P＜0.05)oPRMT5过表达可以显著抑制DOX所致的细胞m6A水平增加(P＜0.01),特别是可以降低DNA损伤修复相关分子ERCC4、REV3L的RNA甲基化水平,提高这些分子的RNA稳定性.结论 PRMT5通过降低MDA-MB-231细胞DNA损伤修复相关分子的RNA甲基化水平,提高其稳定性,进而导致细胞对DOX敏感性降低.
关键词：PRMT5m6A乳腺癌多柔比星
分类号：R737.9(泌尿生殖器肿瘤)
资助基金：国家自然科学基金(82073202)陕西省创新人才推进计划-科技创新团队项目(2023-CX-TD-67)空军军医大学西京医院学科助推计划项目(XJZT24CY53)空军军医大学西京医院学科助推计划项目(XJZT24JC17)
论文发表日期：2024-07-28
在线出版日期：2026-08-26（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：8( 788-795 )
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