利用PiggyBac转座子技术构建NLRC5基因过表达BEAS-2B细胞系及其功能研究
孙丹妮1
刘欣悦2
饶子凡2
杜岚2
张湘琳2
刘梓谕1
侯诗源1
沈星1
刘蓉蓉1
吴兴安1
1.空军军医大学基础医学院 微生物与病原生物学教研室,陕西西安 7100322.空军军医大学基础医学院学员五大队,陕西西安 710032
摘要:目的 利用PiggyBac转座系统构建稳定表达NLRC5的BEAS-2B细胞系,为后续针对病毒抗原提呈功能的研究提供有力的工具.方法 根据NLRC5基因信息扩增目的基因蛋白编码序列,构建目的基因NLRC5的转座子质粒,将辅助质粒和转座子质粒共转染至BEAS-2B细胞.嘌呤霉素筛选稳定转导的细胞后进行单克隆化,最后对获取的单克隆细胞在分子水平上进行过表达验证.结果 成功构建一株NLRC5过表达的BEAS-2B细胞,且该细胞系可维持正常细胞活性与增殖能力.结论 通过PiggyBac转座子技术实现了NLRC5的过表达,进而提高了 MHC-Ⅰ分子基因的表达.通过对该基因的过表达从而研究NLRC5对MHC-Ⅰ抗原肽提呈途径的调控机制,为理解抗病毒免疫的复杂机制以及开发新的治疗策略提供有力支持.
关键词:NLRC5PiggyBac转座子基因过表达稳定转染细胞株
分类号:R392(医学免疫学)Q78(基因工程(遗传工程))
资助基金:国家自然科学基金(82272330)陕西省自然科学基金(2024JC-ZDXM-42)
论文发表日期:2025-04-30
在线出版日期:2026-08-26(本平台首次上网日期,不代表文献的发表时间)
页数:7( 526-532 )
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空军军医大学学报

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AMI
ISSN:2097-1656
年,卷(期):2025,46(4)
所属栏目:基础医学