VIM通过调控上皮-间质转化增强非小细胞肺癌顺铂耐药性
马伊萱
王珂
空军军医大学国家分子医学转化中心,陕西 西安 710032
摘要：目的 基于转录组测序分析与细胞实验,筛选调控非小细胞肺癌(NSCLC)细胞顺铂耐药的潜在关键分子,并验证其功能.方法 通过 GEO 数据库转录组测序数据,筛选人 NSCLC A549 细胞及其顺铂耐药株A549/DDP 细胞的差异表达基因(DEGs);结合 KEGG 和 GO 富集分析差异基因富集通路;将 NSCLC 细胞分为对照组(A549 细胞)和耐药组(A549/DDP 细胞),采用 qRT-PCR 和 Western blotting 实验检测关键差异基因的表达;利用瞬时干扰技术构建波形蛋白(VIM)敲低细胞系(A549/DDP-siVIM),并分析该细胞(siVIM 组)与A549 细胞(A549 组)、A549/DDP 细胞(DDP 组)的耐药性差异.结果 细胞划痕实验显示,与 A549 细胞相比,A549/DDP 细胞的体外迁移能力显著增强(P<0.01).转录组测序分析鉴定出 A549 和 A549/DDP 细胞间存在165 个 DEGs;KEGG 和 GO 富集分析显示这些 DEGs 显著富集于与上皮-间质转化(EMT)相关的通路,提示EMT 可能参与调控顺铂耐药细胞的迁移能力.VIM 是两组细胞中差异最显著的基因,qRT-PCR 和 Western blotting证实其在 A549/DDP 细胞中的表达水平显著高于 A549 细胞;干扰 A549/DDP 细胞中 VIM 的表达可降低间质标志物 N-cadherin 的水平,且 GEPIA 数据库分析表明,在 NSCLC 中 VIM 的表达与 EMT 关键诱导信号分子表达呈正相关.细胞划痕实验表明,干扰VIM 可抑制A549/DDP 细胞的迁移能力(P<0.01).细胞增殖实验显示,在8 mg/L 顺铂作用下,A549/DDP 细胞的存活率高于 A549 细胞,而敲低 VIM 后,其细胞存活率显著降低(P<0.01).结论 本研究成功鉴定出 VIM 是调控 NSCLC 细胞顺铂耐药的关键分子,发现其能增强耐药细胞的迁移能力并降低细胞对顺铂的敏感性,为逆转 NSCLC 顺铂耐药提供了新的潜在治疗靶点.
关键词：非小细胞肺癌波形蛋白上皮-间质转化细胞迁移细胞增殖顺铂耐药差异表达基因转录组测序
分类号：R734.2(呼吸系肿瘤)
资助基金：中国科学技术协会青年人才托举工程项目(YESS20200011)
论文发表日期：2026-04-30
在线出版日期：2026-08-26（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：6( 526-531 )
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