腺病毒介导的BMP-2基因诱导脂肪间充质干细胞向成骨细胞定向分化
邵云峰
刘俊杰
陈能
1.南山区蛇口人民医院骨科, 广东深圳,5180002.南山区蛇口人民医院骨科, 广东深圳,5180003.南山区蛇口人民医院骨科, 广东深圳,518000
摘要:目的 探讨入骨形态发生蛋白-2(BMP-2)基因通过腺病毒转染青山羊脂肪间充质干细胞(ADSCs)的可行性及其向成骨细胞定向分化的能力.方法 取麻醉状态下青山羊腹股沟脂肪组织,经体外分离培养获得ADSCs,转染以腺病毒介导的人BMP-2基因.倒置相差显微镜观察细胞形态,MTT法检测ADSCs生长增殖情况,免疫细胞化学法对ADSCs细胞进行碱性磷酸酶(ALP)活性测定,SABC法检测ADSCs Ⅰ型胶原的表达,通过RT-PCR、Western blot法检测BMP-2基因的表达水平.结果 转染人BMP-2基因的ADSCs形态规则;细胞生长速度快,且随培养时间的延长逐渐增多(P<0.05);成骨诱导后,转染组细胞ALP活性和Ⅰ型胶原表达强度明显高于未转染组(P<0.05);转染组ADSCs BMP-2基因mRNA水平和蛋白含量均明显强于未转染组(P<0.05).结论 经腺病毒介导的人BMP-2基因转染的青山羊ADSCs在体外诱导培养中可以向成骨细胞定向分化,并保持较强的增殖能力;转染后细胞BMP-2目的基因表达增高.
关键词:脂肪间充质干细胞骨形态发生蛋白质类腺病毒科转染细胞培养的细胞分化成骨细胞
分类号:R329.24(人体形态学)R318.17(医用一般科学)
资助基金:深圳市科创委基金(20150305190447)
论文发表日期:2016-01-01
在线出版日期:2025-08-15(本平台首次上网日期,不代表文献的发表时间)
页数:7( 221-227 )
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