人BDNF重组逆转录病毒载体的构建
阳运康1
林月秋2
汤逊2
蔡培强2
1.四川省泸州医学院附属医院骨科2.650032,昆明,成都军区昆明总医院骨科
摘要：目的构建PLEGFP-BDNF真核表达重组逆转录病毒,为进一步在细胞中表达及移植治疗作准备.方法按照hBDNF基因全长编码序列设计合成引物,从人基因组DNA中扩增出744bp的hBDNF基因片段,插入到PMD18-T载体上,转化DH5α大肠杆菌菌株,获得PMD18T-BDNF克隆,对该克隆进行 限制性酶切分析和DNA序列测定;从阳性克隆中获取hBDNF全长编码片段,与真核表达载体PLEGFP质粒连接,构建PLEGFP-BDNF真核表达重组质粒.重组质粒转化大肠杆菌JM109,再经氨苄LB培养基筛选,酶切,PCR与测序鉴定.结果PLEGFP-BDNF重组逆转录病毒构建成功.结论hBDNF在大肠杆菌中的成功表达在转基因治疗CNS病变方面具有潜在应用价值.
关键词：h.BDNF基因克隆重组逆转录病毒载体质粒
分类号：R3(基础医学)
资助基金：云南省自然科学基金(2002C0070M)
论文发表日期：2005-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：4( 224-227 )
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