骨髓间充质干细胞定向诱导成骨分化的蛋白质组学分析
周颖
侯树勋
陈秉耀
刘彦
张春丽
衷鸿宾
1.解放军总医院第一附属医院全军骨科研究所,北京,1000482.解放军总医院第一附属医院全军骨科研究所,北京,1000483.解放军总医院第一附属医院全军骨科研究所,北京,1000484.解放军总医院第一附属医院全军骨科研究所,北京,1000485.解放军总医院第一附属医院全军骨科研究所,北京,1000486.解放军总医院第一附属医院全军骨科研究所,北京,100048
摘要：目的 通过对人骨髓间充质干细胞(hBMSCs)定向诱导成骨细胞分化过程中不同分化阶段的比较蛋白质组学分析,寻找与干细胞分化的启动、进展及成熟有关的功能蛋白质,为研究干细胞的调控分化提供线索.方法 采用贴壁培养法从人骨髓中分离获得hBMSCs,体外扩大培养,以成骨诱导培养体系诱导BMSCs定向成骨细胞分化,选取诱导的1、7、14、21d,分别提取未诱导细胞及诱导组细胞的总蛋白,采用荧光差异凝胶电泳技术分离各组总蛋白,图像分析检测差异表达的蛋白质点,经酶切后行蛋白肽质量指纹谱和数据库检索,鉴定差异蛋白表达.结果 贴壁细胞于3d左右开始伸出突起,2～6d时细胞增殖较缓慢,逐渐长为梭形,7d开始细胞增殖迅速,细胞呈漩涡状生长,15d左右逐渐达到完全融合.碱性磷酸酶染色鉴定BMSCs向成骨诱导分化,BMSCs染色阴性,成骨细胞阳性.BMSCs与成骨细胞凝胶图像存在多个蛋白差异点,选取45个差异点,切胶作质谱分析.经质谱分析和数据库检索后鉴定到23个差异表达蛋白质点,大多数差异点蛋白的功能涉及细胞骨架形成、能量代谢、信号转导等过程.结论 应用蛋白质组学方法,从功能蛋白质组学的层面阐述BMSCs定向诱导成骨分化相关的重要蛋白的变化,可以为更深入揭示BMSCs定向分化的分子机制提供依据.
关键词：骨髓间充质干细胞成骨蛋白质组学
资助基金：国家自然科学基金(30471764)
论文发表日期：2009-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：4( 296-299 )
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