三种HLA-A/0201限制性表位肽尤文肉瘤树突状细胞疫苗的抗肿瘤免疫作用
彭伟1
黄迅悟1
赵伟鹏2
赵铭1
杨大志3
1.解放军第309医院全军骨科中心,北京,1000912.300060,天津医科大学附属肿瘤医院3.400014,重庆医科大学附属儿童医院重点实验室
摘要：目的比较不同EWS/FLI-1蛋白HLA-A/0201限制性表位肽对尤文肉瘤树突状细胞(dendriticcell，DC)疫苗的抗肿瘤作用。方法综合运用BIMAS、SYFPEITHI软件筛选与人白细胞抗原HLA-A/0201结合力强的EWS/FLI-1蛋白9肽表位，并合成其表位肽。采用4 h标准51Cr释放实验检测刺激细胞毒性T淋巴细胞( cytotoxic T lymphocytes，CTLs )对肿瘤细胞的杀伤效应。应用酶联免疫斑点法( enzyme linked immunospot assay，ELISPOT )检测表位肽对DC疫苗刺激的效应细胞γ-干扰素( interferon，IFN-γ)的释放。在此基础上，进行免疫治疗的动物实验，比较其体内抗肿瘤作用。结果筛选出EWS306、EWS289及EWS 401与HLA-A/0201具较强的结合性，其合成出的表位肽分别为：QLWQFLLEL ( EWS 306)、ILGPTSSRL ( EWS 289)和SMYKYPSDI ( EWS 401)。3组表位肽均有较强的杀伤力，当效-靶比为50∶1时，杀伤率EWS 306组(20.2±1.8)%、EWS 289组(12.6±0.3)%、EWS 401组(11.9±0.2)%，而对照组为(6.7±0.1)%；当效-靶比为100∶1时，表位肽的三组杀伤作用明显提升，杀伤率EWS 306组最高为(51.2±3.7)%、EWS 289组(24.6±2.1)%、EWS 401组(17.8±0.9)%，对照组为(7.2±0.2)%。EWS 306组同其它组比较，差异有统计学( P＜0.05)。EWS 306组分泌的IFN-γ为(118.3±3.6)个点明显高于EWS401组(35.1±1.0)个和EWS 289组(34.2±0.9)个，对照组为(5.0±0.1)个( P＜0.05)。EWS 306组肿瘤的体积(978.9±28.2) mm3明显小于阴性对照组(1992.9±16.1) mm3和空白对照组(2001.9±12.3) mm3( P＜0.05)。接种后第35天，EWS 306组存活率为80%大于空白对照组为0%、阴性对照组为10%( P＜0.05)；接种后第40天，空白对照组降为0%， EWS306组为80%明显大于和2个对照组(P＜0.05)。结论 EWS/FLI-1蛋白表位肽中EWS306较EWS289和EWS 401对DC的抗肿瘤作用更强，能够有效激活CTLs对肿瘤细胞的杀伤效应，为尤文肉瘤的免疫治疗提供了新的方向。
关键词：肽类药物筛选试验抗肿瘤抗肿瘤药限制性表位肽尤文肉瘤
分类号：R738.1(运动系肿瘤)
资助基金：国家自然科学基金(81472183)
论文发表日期：2014-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：5( 786-790 )
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