人CCAAT增强子结合蛋白α基因影响骨肉瘤细胞生长活性研究
冀全博1
徐小洁2
张强1
张立3
徐亚梦1
梁迎春2
王涛2
李玲2
郭靖2
叶棋浓2
王岩1
1.解放军总医院骨科, 北京,1008532.军事医学科学院生物工程 研究所, 北京,1008533.总参警卫局卫生保健处,北京,100017
摘要:目的:构建带Myc(pXJ-40)标签的CCAAT增强子结合蛋白α(CCAATenhancerbindingproteinα,C/EBPα)的真核表达载体,并检测其对骨肉瘤细胞生长的影响。方法应用聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR )技术从人乳腺文库中扩增出C/EBPα全长编码区基因;将扩增基因克隆到Myc载体中,并将重组质粒转染人胚胎肾293T细胞;Western blotting检测表达情况;另将重组Myc-C/EBPα质粒转染人骨肉瘤细胞系U2OS (实验组)、Myc空载体质粒转染U2OS细胞(对照组),生长实验检测C/EBPα对肿瘤细胞生长的影响。结果成功构建Myc-C/EBPα真核表达质粒,重组质粒转染人胚胎肾293T细胞后成功表达。生长实验显示Myc-C/EBPα转染的U2OS细胞的生长明显受限,随着培养时间延长,受抑制的程度逐渐增大,培养至第5天,Myc-C/EBPα转染的实验组细胞生长抑制率为58%,且细胞的生长速率OD=0.495明显低于空白对照组1.179,差异有统计学意义(P<0.01)。结论 C/EBPα对骨肉瘤细胞的生长具有抑制作用。
关键词:CCAAT增强子结合蛋白α骨肉瘤基因肿瘤抑制肿瘤细胞培养的
分类号:R738.1(运动系肿瘤)
资助基金:国家自然科学基金(31100604)国家自然科学基金(81101387)国家自然科学基金(81472589)北京市科技新星计划(Z141102001814055)北京市自然科学基金(7132155)军事医科院创新基金转化医学项目(ZHYX003)
论文发表日期:2015-01-01
在线出版日期:2025-08-15(本平台首次上网日期,不代表文献的发表时间)
页数:5( 15-19 )
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