miR-130a对IL-1β诱导骨关节炎细胞模型的保护作用及机制研究
卢伟广
汤善华
王灿斌
335000江西,中国人民解放军联勤保障部队第908医院骨科第三病区
摘要:目的 研究miR-130a对白介素-1β(interleukin-1 β,IL-1β)诱导骨关节炎细胞模型的保护作用及机制.方法 培养大鼠骨关节软骨细胞ATDC5,用不同浓度IL-1β(0、1、5、10 ng/ml)刺激后检测miR-130a表达的变化;另外将ATDC5细胞分为对照组、miR-NC组、IL-1β+miR-NC组、IL-1β+miR-130a组、Ad-NC 组、Ad-NC+IL-1β 组、Ad-NC+IL-1β+miR-130a 组、Ad-PTEN+IL-1β+miR-130a 组,用10 ng/ml IL-1β活力并转染阴性对照(NC)miR、miR-130a、NC腺病毒、过表达PTEN的腺病毒,MTS法检测细胞活力A490,TUNEL法检测凋亡率,western blot检测PTEN、p-PI3K、p-AKT表达水平,双荧光素酶报告基因验证miR-130a靶向调控PTEN基因.结果 1、5、10 ng/ml IL-1β刺激ATDC5后miR-130a的表达水平分别为(0.74±0.15)、(0.62±0.09)、(0.54±0.08),均低于0 ng/ml IL-1β 组(0.94±0.14)(P<0.05)且10 ng/ml IL-1β刺激后miR-130a表达降低最显著.IL-1β+miR-NC组A490水平、p-PI3K及p-AKT表达水平分别为(0.45±0.09)、(0.40±0.09)、(0.60±0.10),低于对照组(0.92±0.21)、(0.89±0.16)、(0.97±0.17)以及 miR-NC 组(0.88±0.19)、(0.93±0.18)、(1.08±0.22),凋亡率、PTEN 表达水平分别为(25.61±5.52)%、(0.95±0.18),高于对照组(3.84±0.95)%、(0.52±0.09)以及 miR-NC 组(4.41±0.84)%、(0.60±0.12)(P<0.05);IL-1β+miR-130a 组 A490水平、p-PI3K 及 p-AKT 表达水平分别为(1.05±0.26)、(0.85±0.17)、(1.04±0.21),高于 IL-1β+miR-NC 组,凋亡率、PTEN 表达水平分别为(8.95±1.48)%、(0.56±0.10),低于IL-1β+miR-NC组(P<0.05);miR-130a组野生型PTEN双荧光素酶报告基因的荧光活力为(0.38±0.09),低于 miR-NC 组(0.83±0.15)(P<0.05);Ad-PTEN+IL-1β+miR-130a 组的 A490水平为(0.39±0.08)、低于 Ad-NC+IL-1β+miR-130a 组(0.86±0.16),凋亡率为(23.11±6.95)%、高于 Ad-NC+IL-1β+miR-130a 组(6.58±1.21)%(P<0.05).结论 miR-130a对IL-1β诱导骨关节炎细胞模型具有保护作用,靶向调控PTEN表达并增强细胞活力、抑制细胞凋亡是可能的分子机制.
关键词:骨关节炎白细胞介素1β细胞凋亡
分类号:R684.3(骨科学(运动系疾病、矫形外科学))
论文发表日期:2021-07-19
在线出版日期:2025-08-15(本平台首次上网日期,不代表文献的发表时间)
页数:7( 554-560 )
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中国骨与关节杂志

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ISSN:2095-252X
年,卷(期):2021,10(7)
所属栏目:临床研究与实践