sMiMi-CK cDNA的克隆、表达及活性检测
李芳1
李守岩2
王孝铭1
关振中3
1.哈尔滨医科大学病生教研室,1500862.黑龙江省前哨农场医院3.哈医大附属第二医院心内科
摘要:目的本实验拟通过RT-PCR技术,克隆及表达大鼠心肌线粒体sMiMi-CK基因.方法从大鼠心肌线粒体总RNA中扩增出sMiMi-CK DNA片段(1.33kb),将该片段克隆到载体pUC19上,对其进行酶切和测序,然后将其克隆到PBV220上,经温度诱导,使其在大肠杆菌中得以表达,并用NADH法测其活性.结果sMiMi-CK基因序列与国外报导的序列完全一致,表达的sMiMi-CK分子量为45.8KD,占菌体总蛋白的10.7%,其活性为2.74×105IU/L菌液.结论sMiMi-CK基因的克隆及表达,为今后从基因水平上研究心肌缺血性损伤的机制及治疗提供了依据.
关键词:sMiMi-CKRT-PCR克隆表达
分类号:R3(基础医学)
资助基金:国家自然科学基金(D09613)
论文发表日期:1999-01-01
在线出版日期:2025-08-15(本平台首次上网日期,不代表文献的发表时间)
页数:3( 267-269 )
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中国急救医学

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北大核心CSTPCD
ISSN:1002-1949
年,卷(期):1999,19(5)
所属栏目:论著