高迁移率族蛋白B1的表达纯化及其对单核细胞释放炎症因子的影响
丁宁1
肖慧2
高巨3
许立新1
佘守章1
1.广州市第一人民医院麻醉科,5101802.广州市第一人民医院门诊部,5101803.广州中医药大学第二附属医院(广东省中医院)麻醉科,510120
摘要：目的 通过重组HMGB1蛋白,观察其对单核细胞株THP-1释放炎症因子的影响.方法 用RT-PCR方法扩增人HMGB1 cDNA,将目的 片段HMGB1亚克隆到原核表达载体pGEX4T-1并转化大肠杆菌BL21,以IPTG诱导HMGB1融合蛋白表达,经Ni2+-NTA和多黏菌素B亲和层析柱纯化蛋白.分别用不同浓度的重组HMGB1蛋白(10、50和100 ng/mL)刺激THP-1细胞24 h,应用Liquichip液相蛋白芯片系统检测培养上清中TNF-α、IL-1、IL-6和IL-8的浓度;以终浓度为100 ng/mL的HMGB1蛋白分别刺激THP-1细胞1、3、6、12和24 h,检测上述细胞因子的浓度.结果成功表达、纯化了重组HMGB1蛋白,与对照组相比,浓度为10、50和100 ng/mL的HMGB1蛋白均使TNF-α、IL-1、IL-6和IL-8的分泌增加(P均<0.05),并且随着HMGB1蛋白剂量的增加呈递增趋势;上述细胞因子水平在以100 ng/mL的HMGB1刺激后3 h或6 h即开始升高(P均<0.05),并且均随刺激时间的延长而呈递增趋势.结论 HMGB1可诱导一系列细胞因子的产生和释放,为临床防治脓毒症提供了一个新的靶点.
关键词：高迁移率族蛋白B1单核细胞脓毒症炎症因子
分类号：R349.64(基础医学)
资助基金：广州市医药卫生科技一般引导项目(2008-YB-012,2009-YB-021;2008-ZDi-14;A2009497)
论文发表日期：2009-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：4( 711-714 )
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